蛋白分析FAQ汇总

• • 请问胰岛素样肽那个B-C-A链是怎么区分的呢？

  胰岛素样肽（如胰岛素（Insulin）或胰岛素样生长因子（IGF-1/IGF-2））的B链、C链、A链是根据其结构和生物合成过程进行区分的。这些链分别代表不同的功能域，在结构上有明确的划分。

• • 请问杂蛋白鉴定后怎么得到最大蛋白的三维结构和序列呢？

  杂蛋白鉴定后通常需要通过多个步骤来确定蛋白质的三维结构和氨基酸序列。这个过程涉及一系列的实验技术和计算方法，具体步骤如下：

• • 请问电泳出来的胶条去打质谱样品怎么处理呢？怎么酶切和除盐呢？

  电泳结束后，处理胶条的步骤包括：切割胶条并用氨基甲酸钠溶液洗涤以去除SDS和染色剂。接着，使用DTT还原蛋白，然后加入胰蛋白酶进行酶切。最后，通过超滤和固相萃取（SPE）去除盐分和杂质，得到可用于质谱分析的样品。

• • 请问用戊二醛交联时终止反应可以加1Mtris缓冲液吗？

  是的，在用戊二醛交联反应时，1 M Tris缓冲液是常用的终止反应的试剂。使用方法如下：   1、终止交联反应 （1）在交联反应结束后，直接向反应体系中加入等体积或适量的1 M Tris缓冲液（pH 7.0-8.0）。 （2）混合均匀，反应5-10分钟即可。   2、后续处理 （1）根据实验

• • 请问基于什么原理来选择多肽的序列呢？

  选择多肽序列的核心原则是根据实验目标、靶标特性和研究需求，结合生物化学特性和实验可行性来设计。以下是一些主要的考虑因素：   一、实验目标 1、抗体制备：优选暴露于蛋白表面、亲水性较强的抗原表位，确保高效触发免疫反应。 2、靶标识别：针对筛选配体或抑制剂，设计与靶标结合区域匹配的序列。 3、

• • 请问体内交联方法是怎样的？

  下面是一个体内交联实验通用的方法步骤可供您参考：   一、交联剂的选择 选择合适的交联剂是体内交联成功的关键，不同的交联剂有不同的作用距离（即可连接分子的最大距离）和化学性质，适合不同类型的分子相互作用。常用的交联剂有以下几种： 1、甲醛：适用于捕捉短暂的蛋白质-蛋白质和蛋白质-核酸相互作用

• • 请问DSS交联后跑胶的步骤是什么？需要用非变性的胶和loading吗?

  DSS交联后的蛋白质跑胶的步骤主要包括以下几个部分：   1、样品制备 用DSS交联后，用去离子水或PBS缓冲液对样品进行清洗，以去除未反应的DSS。根据实验需要，使用非变性的聚丙烯酰胺（PAGE）凝胶进行电泳。在准备样品时，可以将样品与上样缓冲液（loading buffer）混合，以确保

• • 请问有没有panSUMO的推荐？

  panSUMO 是一种用于 SUMO 蛋白质的抗体，常用于研究 SUMO 化修饰相关的生物学过程。如果你在寻找具体的产品推荐，建议查阅一些信誉良好的实验室供应商，如 Abcam、Cell Signaling Technology 或 Santa Cruz Biotechnology。这些公司

• • 请问细胞交联的话也是在Hepes里吗，然后DSS往Hepes里逐滴加吗？缓冲液可以换成PBS吗？

  细胞交联通常是在Hepes中进行的。当DSS用作交联剂时，确实是逐滴加入Hepes缓冲液中。这可以确保DSS能够均匀地分布在缓冲液中，从而确保细胞之间的交联效果。   至于缓冲液能否换成PBS，这取决于你的具体实验需求。Hepes和PBS都是常用的生物学实验缓冲液，它们具有不同的缓冲能力和离

• • 对照组是一种蛋白质，实验组是这种蛋白质上修饰了一种多肽，请问测质谱的时候这两个组是不是要控制蛋白质的浓度要一致呀?

  是的，在质谱分析中，对照组和实验组的蛋白质浓度应该保持一致。这是为了确保在比较两组时，任何观察到的差异都可以归因于修饰的多肽而不是由于浓度差异导致的信号强度变化；这样可以提高实验的可靠性和结果的准确性。此外，样品的处理、酶切和除盐步骤也应尽量保持一致，以减少技术变异。   百泰派克生物科技—