请问蛋白加了loading,煮了后-20°可以保存多久啊?
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若是短期内用于Western blot、电泳等操作,-20°C保存1-2周问题不大。
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若样品稀有或需重复使用,应转-80°C并尽量避免冻融。
蛋白样品加入loading buffer并煮沸变性后,一般建议短期保存于-20°C(不超过1个月),若需长期保存(超过1个月)建议转至-80°C。
以下是关键考量因素:
1、变性程度与稳定性:样品经过SDS和β-ME或DTT处理、煮沸变性,蛋白质已不再具天然构象,理论上不会再发生显著降解。但若反复冻融,会导致聚合或沉淀。
2、冻融次数:建议分装保存,避免反复冻融引起样品浓缩或变性不均。
3、保存目的:
结论:已加loading并煮沸的蛋白样品在-20°C可保存1-2周为宜,最长不超过1个月;如需更长时间或样本重要,请转-80°C保存,并避免反复冻融。
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