翻译后修饰蛋白组分析

    蛋白质翻译后修饰(PTMs)是指蛋白质在翻译中或翻译后的化学修饰过程。蛋白质翻译后修饰(PTMs)通过给蛋白质添加磷酸酯、乙酸酯、酰胺基或甲基等官能团增加蛋白质组的功能多样性,并影响正常细胞生物学和发病机理的几乎所有方面。蛋白质翻译后修饰在许多细胞过程中起着关键作用,如细胞分化、蛋白质降解、信号传导和调节过程、基因表达调节以及蛋白质相互作用。蛋白质翻译后修饰PTMs通常包括磷酸化、糖基化、泛素化、亚硝基化、甲基化、乙酰化、脂质化和蛋白水解。因此,PTM的特征(包括修饰类别和修饰位点)在细胞生物学以及疾病诊断和预防研究中至关重要。

    蛋白质翻译后修饰(PTMs)受许多因素影响,鉴定过程比较繁琐。例如:大多数翻译后修饰水平很低。因此,在鉴定之前必须对修饰蛋白进行富集。此外,修饰的稳定性以及质谱的检测效率也是PTMs分析过程中的关键因素。百泰派克生物科技搭建有高级的分析平台,可用于表征各种翻译后修饰(PTM)。

    BTP-蛋白质翻译后修饰鉴定能够解决的生物学问题

    百泰派克公司采用Thermo Fisher的Q ExactiveHF质谱平台,Orbitrap Fusion质谱平台,Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC,为广大科研工作者提供磷酸化/糖基化/泛素化/乙酰化/甲基化/二硫键/亚硝基化等翻译后修饰鉴定。

    蛋白质氨基酸序列的特定位置可以与化学基团或者小分子量的蛋白共价结合从而发生蛋白质翻译后修饰(post-translational modifications,PTMs),相较于没有发生修饰的蛋白,PTMs会导致特定序列分子量的增加。在蛋白翻译后修饰方式的鉴定过程中,蛋白会首先被酶切成肽段,然后进入质谱进行分析;通过质谱分析,得到的是一系列肽段的分子质量信息。对于某一个特定肽段而言,在没有发生任何翻译后修饰的情况下,其序列信息和分子量是确定的;

    蛋白质翻译后修饰方式鉴定示意图

    蛋白质翻译后修饰方式鉴定示意图


    当它发生了某种翻译后修饰之后,例如磷酸化修饰,由于序列信息和分子量是确定的,磷酸根的分子量也是确定的;在质谱检测过程中发现其中的部分肽段的分子量刚好增加了一个磷酸根的分子量,假设这个肽段就发生了磷酸化修饰,再通过二级质谱图进行二次确认。

    各类PTMs的常见功能

    PTMs的常见功能

    PTMs的常见功能

     

    研究案例

    该项目是中国科学院生物物理所一位老师Co-IP样品在百泰派克进行蛋白泛素化修饰位点鉴定。得到的部分结果如下图所示:

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    蛋白质翻译后修饰方式鉴定研究案例

     

    BTP提供以下蛋白质翻译后修饰鉴定分析服务

     
     
     
     
     
     
     
     
     
     
     
     
     
     

    中/英文项目报告

    在技术报告中,百泰派克生物科技会为您提供详细的中英文双语版技术报告,报告包括:
    1. 实验步骤(中英文)
    2. 相关的质谱参数(中英文)
    3. 翻译后修饰位点信息
    4. 原始数据
    5. 生物信息学分析

    一站式服务

    您只需下单-寄送样品 百泰派克一站式服务完成:样品处理-上机分析-数据分析-项目报告

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