高通量基因敲除服务
- 传统基因敲除技术:通量低，通常2-3个月完成几十个敲除细胞系的构建；
- 高通量基因敲除技术:通量高，通常1-2个月即可获得几百个敲除细胞系的构建。
- 传统基因敲除技术:敲除效率在30-90%左右，且不均一；
- 高通量基因敲除技术:敲除效率很高，可达70-100%。
- 传统基因敲除技术:KO细胞储备不足3000+；
- 高通量基因敲除技术:人类全基因组覆盖，KO细胞储备高达19000+。
“敲除”相关哺乳动物基因是研究基因功能或其作为药物靶点潜力的一种重要方法，在阿尔茨海默病、癌症、心血管疾病、炎症或代谢疾病等神经退行性疾病研究中都被广泛应用。CRISPR/Cas9是一种革命性的基因编辑技术，可以精确修改基因组序列。CRISPR是细菌和古细菌中的一种免疫系统，能够识别并切割入侵病毒的基因组。通过引入Cas9蛋白和相应的向导RNA，CRISPR/Cas9技术可以精确定位和切割特定的DNA序列，实现基因敲除、点突变和基因插入。CRISPR/Cas9介导的基因编辑具有巨大的临床应用潜力，随着该技术的日趋成熟，其在药物靶点发现和验证、基因功能研究、基因治疗、癌症免疫疗法等众多领域发挥着越来越重要的作用。
Neil, C.; et al. ACS Synthetic Biology. 2022.
CRISPR/Cas9基因敲除技术
为满足基础研究及医药研发的需求，科研领域急需获得系列靶基因/全基因组的敲除细胞。百泰派克生物科技（BTP）采用优化的CRISPR/Cas9系统为您提供高通量基因敲除服务，我们的人全基因组基因敲除阵列Array文库覆盖了完整的人类全基因组，全基因组阵列敲除库已在人原代细胞全部完成高内涵筛选的验证，超过80%以上的靶点达到70%以上的敲除效率。
BTP致力于为您提供最简单易用的高通量CRISPR基因敲除服务，包括病毒包装、质粒制备、Cas9浓度测试等，为您解决选择哪个细胞进行敲除、可不可以敲除、如何敲除以及敲除效率如何等关键问题。可进行单/多基因敲除、移码突变和大序列敲除。您只需提供基因名和目标细胞，百泰派克生物科技负责所有项目后续，包括项目评估（靶基因是否在目标细胞中表达、是否是必需基因）、KO实验、KO细胞验证、冻存KO细胞和活KO细胞交付。
服务优势
1.样本适用性强
适用于人、小鼠的细胞系，原代细胞，免疫细胞及iPS细胞等。
2.基因必要性及表达量分析
在进行基因敲除实验前，我们会基于生物信息学和蛋白质组学数据对不同细胞中基因必要性及表达量进行分析，确保实验的可行性，降低实验风险。
3.gRNA无需从头设计和验证
我们完成了人类全基因组gRNA的全部验证，与药物相关的靶点也完成了PCR测序验证，无需针对客户的靶点设计预实验进行gRNA验证，大大缩短了项目周期。
4.高通量高效率
我们采用优化的CRISPR/Cas9系统进行高通量基因敲除，多个sgRNA/靶基因设计保证高敲除效率，超过80%靶点敲除效率在70%以上，短期内（10天内）即可提供高敲除效率的KO pool，满足绝大多数的应用场景。
5.敲除效率双验证
基因敲除后，我们采用WB实验中抗体KO验证的首选方法——Sanger测序和深度蛋白质组学技术对敲除效率进行双验证，数据真实性的双重保障。
应用案例
1.基因治疗
Dever DP, et al. Nature. 2016.
2.免疫细胞工程
Roth TL, et al. Nature. 2018.
3.基因功能研究
Gordon DE, et al. Science. 2020.
4.药物靶点筛选
Morgens DW, et al. Nat Biotechnol. 2016.
常见问题：
问题1.高通量基因敲除技术对比传统基因敲除技术有哪些优势？
回答：高通量基因敲除技术相比传统基因敲除技术如慢病毒包装法和质粒法等有以下优势:
1）编辑通量
2）编辑效率
3）KO细胞储量
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