蛋白分析FAQ汇总
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可以,但需要明确检测目标和实验条件,以便选择合适的方法。以下是几种常见策略:一、如果只想判断是否存在蛋白或肽:快速定性筛查:1. SDS-PAGE 电泳 + 染色(如 Coomassie 或银染)目的:初步判断样品中是否存在蛋白质(>5 kDa)。局限:不适用于小肽或低丰度蛋白,灵敏度有限。
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• 用DMSO配制DSS高浓度母液,再加到pbs细胞混悬液后,会有很多絮状物析出,这怎么办呢?
出现大量絮状物析出,说明 DSS(Dextran Sodium Sulfate)在当前体系中不完全溶解或发生了析出反应。结合所述的操作流程(DMSO溶解DSS,高浓度母液,加入PBS细胞悬液后析出),问题可从以下几个层面分析,并提供对应建议:一、问题本质分析 1. DSS的理化性质 DSS是
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组织交联实验,通常特指甲醛交联实验,它是研究蛋白质与DNA相互作用的关键核心技术,是染色质免疫共沉淀技术的基石。以下是常见的组织交联实验方法及步骤概述:一、核心原理 甲醛是一种高活性的小分子,它可以在常温下、在生理条件下,高效地在空间上距离很近的分子之间形成共价键桥。具体来说:1. 交联蛋
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• 做质谱前处理的时候用了高压过但是台外开过的枪头会有影响吗?
会有影响。即便枪头以前做过高压灭菌,在台外打开或存放不当仍会引入环境颗粒、皮屑/角蛋白、可溶性有机污染物(塑化剂/聚合物残留)以及蛋白酶/核酸酶等,这些都可能干扰质谱灵敏度、产生背景峰或导致样品污染/降解。下面给出判断与补救建议(可直接操作)。一、为什么会有风险 灭菌只灭活微生物,不能保证去
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氨基酸分析法测定蛋白含量的核心原理是:将样品中的蛋白质完全水解为游离氨基酸,然后通过氨基酸分析仪测定各氨基酸的摩尔含量,进而根据氨基酸组成和理论分子量换算出蛋白含量。该方法属于绝对定量,常用于标准品定值或参考分析。以下为标准操作流程:一、样品准备 1、样品类型:粉末、冻干物、组织匀浆或蛋白溶
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• 收集血浆标本需不需要无菌操作呢?ep管和枪头需要无菌吗?
收集血浆标本是否需无菌操作,需根据实验目的判断:一、是否需无菌操作:以下情况需尽量采用无菌操作:用于微生物培养、微生物组(metagenomics)分析、内毒素检测等敏感实验;用于细胞功能实验(如PBMC分离后共培养);用于蛋白组学、代谢组学等高通量组学研究中,要求最大限度避免外源蛋白、酶或
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杜马斯法通过高温燃烧样品,使有机物完全分解,将其中的氮元素转化为氮气(N₂)后定量测定。该方法测得的是总氮含量,随后需乘以氮-蛋白转换系数(通常为6.25)以估算粗蛋白含量。一、是否可用于送样测定蛋白含量?需根据以下条件判断:1、样品类型 杜马斯法适用于粉末状、均质、无机盐含量低的固体样品,
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• 请问从亚麻籽中提取出来的粗蛋白可以做蛋白质组学,分析其中的蛋白组成及里面的蛋白功能吗?
可以,但需明确几个关键技术前提和实验局限:一、理论可行性 从亚麻籽(Linum usitatissimum)中提取粗蛋白后,通过蛋白质组学方法分析其蛋白组成和功能在理论上是可行的。植物种子中蛋白质种类丰富,涵盖结构蛋白、储存蛋白、代谢酶、抗逆蛋白等,具备一定的研究价值。二、实验关键点与建议
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• ip是阴性的两个蛋白,用甲醛能体内交联能交联到瞬时的相互作用吗?
甲醛(formaldehyde)作为一种常用的可逆交联剂,主要作用机制是通过与氨基、巯基和羟基等基团反应形成亚甲基桥(-CH₂-),从而将空间上接近的分子交联固定。因此其交联范围和效率受限于分子间距离与接触时间。分析如下:1、“IP是阴性”两个蛋白是否有相互作用?若免疫共沉淀(IP)结果为阴
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关于胃液样品的收集与保存,应根据研究目的(如代谢组、蛋白组、微生物组、病理分析等)选择适当的方法。以下为常规科研中推荐的标准操作流程:一、样品收集 1. 采集方式:常见有以下几种方式:胃镜引流(临床常规):使用胃镜在检查过程中收集胃液,适用于临床研究;鼻胃管采集:适用于连续或定时采集;胃液刺
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