蛋白分析FAQ汇总

• • 请问蛋白质二硫键怎么交联上呢？

  二硫键（Disulfide Bond, S-S）是一种共价键，形成于两个半胱氨酸残基之间的巯基（-SH）氧化反应，连接成二硫键（-S-S-）。二硫键在蛋白质的结构稳定性、折叠和功能中起着重要作用。   一、二硫键交联的形成过程 1、前提条件 （1）蛋白质中必须含有半胱氨酸（Cysteine,

• • 请问怎样从壳聚糖-蛋白质复合物中提取出蛋白质，或者从其中完全除去壳聚糖?

  壳聚糖与蛋白质之间可能通过静电、氢键或疏水相互作用形成复合物，因此分离的关键是要破坏或干扰这些相互作用。   一、解离壳聚糖-蛋白质复合物的方法 为了从复合物中提取蛋白质或去除壳聚糖，可以采用以下方法： 1、改变pH值 壳聚糖在酸性条件下溶解较好，而在碱性条件下形成沉淀，调整pH是破坏壳聚糖

• • 请问分子筛能分离不同大小的活性蛋白吗？

  分子筛可以用于分离不同大小的活性蛋白。它通过孔径的大小选择性地允许特定大小的分子通过，从而实现分离。较小的蛋白质能够进入分子筛的孔隙，而较大的蛋白质则被阻挡，因此在分离过程中，蛋白质的大小是关键因素。这种方法在蛋白质纯化和分析中非常常见。   百泰派克生物科技--生物制品表征，多组学生物质谱

• • 请问蛋白交联的方法是怎样的?这种方法可以用wb做蛋白二聚体四聚体检测么?

  蛋白交联是通过化学试剂将蛋白分子之间或内部的特定官能团连接起来的一种技术，常用于研究蛋白质-蛋白质相互作用、稳定蛋白复合体结构以及检测蛋白二聚体、四聚体等。常见的交联剂包括戊二醛、DSS、BS³、DSP等，不同交联剂根据其反应基团和交联空间距离有不同的应用。

• • 请问怎么在在线数据库查找某个蛋白的突变与疾病的关系？

  要查找某个蛋白的突变与疾病的关系，可以通过多个在线数据库进行检索。以下是几种常用的数据库和方法：

• • 请问胰岛素样肽那个B-C-A链是怎么区分的呢？

  胰岛素样肽（如胰岛素（Insulin）或胰岛素样生长因子（IGF-1/IGF-2））的B链、C链、A链是根据其结构和生物合成过程进行区分的。这些链分别代表不同的功能域，在结构上有明确的划分。

• • 请问杂蛋白鉴定后怎么得到最大蛋白的三维结构和序列呢？

  杂蛋白鉴定后通常需要通过多个步骤来确定蛋白质的三维结构和氨基酸序列。这个过程涉及一系列的实验技术和计算方法，具体步骤如下：

• • 请问电泳出来的胶条去打质谱样品怎么处理呢？怎么酶切和除盐呢？

  电泳结束后，处理胶条的步骤包括：切割胶条并用氨基甲酸钠溶液洗涤以去除SDS和染色剂。接着，使用DTT还原蛋白，然后加入胰蛋白酶进行酶切。最后，通过超滤和固相萃取（SPE）去除盐分和杂质，得到可用于质谱分析的样品。

• • 请问用戊二醛交联时终止反应可以加1Mtris缓冲液吗？

  是的，在用戊二醛交联反应时，1 M Tris缓冲液是常用的终止反应的试剂。使用方法如下：   1、终止交联反应 （1）在交联反应结束后，直接向反应体系中加入等体积或适量的1 M Tris缓冲液（pH 7.0-8.0）。 （2）混合均匀，反应5-10分钟即可。   2、后续处理 （1）根据实验

• • 请问基于什么原理来选择多肽的序列呢？

  选择多肽序列的核心原则是根据实验目标、靶标特性和研究需求，结合生物化学特性和实验可行性来设计。以下是一些主要的考虑因素：   一、实验目标 1、抗体制备：优选暴露于蛋白表面、亲水性较强的抗原表位，确保高效触发免疫反应。 2、靶标识别：针对筛选配体或抑制剂，设计与靶标结合区域匹配的序列。 3、