蛋白分析FAQ汇总

• • 请问sumo预测的位点突变后导致泛素化减少是有什么原因呢？

  SUMO预测位点突变导致泛素化减少的可能机制如下：竞争性修饰干扰，协同信号通路依赖，复合体稳定性受破坏，去泛素化酶（DUB）调控失衡。

• • 我提取细胞蛋白还没有归一化(没加lodingbuffer和pbs)，放在-20°C之后能保存多久呀？

  未进行归一化（未添加loading buffer或PBS）的细胞蛋白样本在-20°C保存的稳定性受以下关键因素影响：蛋白水解风险，pH稳定性。

• • 蛋白没有加Buffer，也没有煮沸，在-20°C冰箱里能放多久呀？

  未添加任何缓冲液（Buffer）且未经煮沸的蛋白质样本在-20°C冰箱中的保存时间受多种因素影响，具体分析如下：

• • 请问龈沟液采完需要加pbs吗？

  龈沟液（gingival crevicular fluid, GCF）是一种存在于牙龈沟中的液体，它包含了多种成分，如免疫球蛋白、细胞因子、酶和代谢产物。由于其成分多样且与牙周病和其他口腔疾病的诊断密切相关，龈沟液成为许多研究和临床实验的关注对象。在龈沟液（GCF）采集后是否需要加入PBS（

• • 体外戊二醛交联，为什么交联之后sds-page的条带脱尾严重，几乎没有主条带呢？该如何改进呀？

  在体外实验中使用戊二醛进行蛋白质的交联反应时，SDS-PAGE分析中经常会观察到条带脱尾和缺乏明显主条带的现象。这种情况可能由多种因素导致。以下是问题的可能原因以及改进建议：

• • 蛋白质加了loadingbuffer煮样跑page会因为高温变性导致蛋白降解吗？

  在SDS-PAGE实验中，蛋白加了Loading Buffer并经过高温变性，主要目的是使蛋白质完全变性、解聚和去除二硫键，从而获得均一的电泳迁移行为。但在这个过程中，大多数蛋白不会降解，因为SDS、DTT（或β-巯基乙醇）等变性剂只会破坏蛋白的二级、三级结构，使其线性化，而不会直接降解主链

• • 请问怎么分析的混合样品的二级结构含量？

  分析混合样品的二级结构含量通常需要结合实验技术和数据分析方法。以下是常用方法说明：

• • 蛋白冻在-80怎么让它恢复活性呢？

  在实验室中，蛋白质通常会被储存在极低温度下（如-80°C）以减少降解和保持其活性。当我们需要使用这些蛋白质时，正确的解冻步骤对于其活性的恢复至关重要。以下是一些步骤和注意事项，帮助确保蛋白质在解冻后尽可能保持其原有的功能特性。

• • WB蛋白不加Loading直接放-80能保存多久呢？

  在 Western Blot (WB) 实验中，蛋白样品在不添加Loading buffer的情况下直接放入-80℃保存，其稳定性会受到以下因素的影响：

• • 如何搜索某蛋白质的同源蛋白的序列？

  在生物学研究中，寻找某一蛋白质的同源蛋白序列可以帮助我们了解蛋白质的功能、进化关系以及结构特性。以下是寻找同源蛋白序列的步骤和方法：