蛋白分析FAQ汇总

• • 请问有没有panSUMO的推荐？

  panSUMO 是一种用于 SUMO 蛋白质的抗体，常用于研究 SUMO 化修饰相关的生物学过程。如果你在寻找具体的产品推荐，建议查阅一些信誉良好的实验室供应商，如 Abcam、Cell Signaling Technology 或 Santa Cruz Biotechnology。这些公司

• • 请问细胞交联的话也是在Hepes里吗，然后DSS往Hepes里逐滴加吗？缓冲液可以换成PBS吗？

  细胞交联通常是在Hepes中进行的。当DSS用作交联剂时，确实是逐滴加入Hepes缓冲液中。这可以确保DSS能够均匀地分布在缓冲液中，从而确保细胞之间的交联效果。   至于缓冲液能否换成PBS，这取决于你的具体实验需求。Hepes和PBS都是常用的生物学实验缓冲液，它们具有不同的缓冲能力和离

• • 对照组是一种蛋白质，实验组是这种蛋白质上修饰了一种多肽，请问测质谱的时候这两个组是不是要控制蛋白质的浓度要一致呀?

  是的，在质谱分析中，对照组和实验组的蛋白质浓度应该保持一致。这是为了确保在比较两组时，任何观察到的差异都可以归因于修饰的多肽而不是由于浓度差异导致的信号强度变化；这样可以提高实验的可靠性和结果的准确性。此外，样品的处理、酶切和除盐步骤也应尽量保持一致，以减少技术变异。   百泰派克生物科技—

• • 蛋白质磷酸化在信号传递中的作用是什么?

  蛋白质磷酸化在信号传递中的具体作用有： 1、调节蛋白质活性：磷酸化可以激活或抑制酶的活性。例如，许多蛋白激酶通过自身或下游靶蛋白的磷酸化来调节其功能，这在信号传导途径中起到了“开关”作用。 2、调控蛋白质相互作用：磷酸化改变蛋白质的结构，使其与其他蛋白质、DNA或膜的结合能力发生变化。这种变

• • 蛋白质圆二色谱分析对蛋白质纯度有要求吗？

  蛋白质圆二色谱（CD）分析对蛋白质的纯度和浓度都有一定要求：   1、纯度要求 为了避免杂质对二级结构信号的干扰，样品应尽可能纯净；杂质如多肽、其他蛋白质或核酸可能会吸收或散射光，导致测量结果偏差；通常蛋白质的纯度应在90%以上，理想情况下甚至接近95%-99%。   2、浓度要求 样品浓度

• • Western blot实验内参蛋白跑出来了，目的蛋白没有条带是怎么回事？

  Western blot实验中内参蛋白有条带，但目的蛋白没有条带可能是由于以下几种原因造成的：   一、抗体问题 1、抗体特异性不强或失效：目的蛋白的抗体可能失效或不具备足够的特异性。建议检查抗体的存储条件、使用时长，或者更换一个新的抗体。 2、抗体浓度不合适：抗体的工作浓度可能过低或过高。

• • 请问2万Da分子大小的肽做液相用什么柱子？

  对于分子量接近2万Da的肽进行液相色谱分离时，通常使用较大孔径的反相高效液相色谱（RP-HPLC）柱，特别是C18柱。   一、C18反相柱 C18柱是最常用的柱子，适合用于肽和蛋白质的分离。对于分子量较大的肽，孔径的选择尤为重要。通常对于2万Da左右的肽，建议使用孔径为300Å（或更大）的

• • 非变性蛋白，未煮，未变性，加loading后可以直接冻存吗？可以加一点ME吗？

  是的，未变性蛋白样品在加loading buffer（上样缓冲液）后是可以直接冻存的，但需要注意以下几点： 可以直接冻存的条件： （1）上样缓冲液（Loading Buffer）不含SDS或变性剂 如果你使用的是非还原性、非变性条件的上样缓冲液（如没有SDS、没有DTT/β-ME、没有加热

• • 请问如何确定蛋白质的分子量，因为预测二级结构好像有这些数据？

  您提到“预测二级结构可能使用蛋白质的分子量信息“，这种说法可能存在误解。蛋白质分子量主要用于分离与鉴定，与二级结构预测并无直接依赖关系。

• • 请问肠组织不加loading buffer直接放-80可以保存多久?

  未经处理的肠组织置于-80℃冷冻保存建议时间不超过1个月，且不适用于高质量蛋白或RNA分析。 若对后续数据质量有要求，建议尽快按实验方向分组处理或加保护剂冷冻。