蛋白分析FAQ汇总

• • 请问同时在一块胶上跑还原SDS-PAGE和非还原SDS-PAGE有影响吗?

  不推荐同时在同一块胶上跑还原（reducing）SDS-PAGE和非还原（non-reducing）SDS-PAGE，主要原因如下：

• • 请问WB没加loading放进-80可以保存多久？膜蛋白是不是不能煮样,难道每一次都要bca吗？

  WB样品未加loading buffer放-80°C，短期（1-2周）可行，长期不推荐。膜蛋白一般不建议煮沸，可用低温孵育或温和裂解法。BCA蛋白定量建议每次都做，除非实验条件极其稳定。以下为详细解释：

• • 我现在需要检测8种多肽，每条多肽氨基酸数量在16-38，暂时没有发现有人测过，请问有什么合适的方法吗？

  检测8种多肽（氨基酸长度16-38），如果没有文献先例，可根据你的实验需求（定性 or 定量、灵敏度、通量等）选择合适的方法。以下是推荐的几种主要检测方法：

• • 做质谱要怎么跑胶呢？

  在进行质谱分析之前，样品通常需要经过凝胶电泳（跑胶）分离以去除杂质和富集目标蛋白。下面是一个关于如何跑胶以进行质谱分析的详细步骤指导。

• • 做质谱跑胶怎么知道是否跑到分离胶呢？

  在质谱跑胶（SDS-PAGE）实验中，为了确认蛋白是否跑到分离胶，可以采取以下方法：

• • 做wb实验蛋白提取了没有离心怎样保存啊？

  在 Western Blot (WB) 实验中，如果蛋白提取后未进行离心，但需要暂时保存，建议按照以下方式操作：

• • 请问非还原SDS-PAGE上样前需要煮样吗？25kDa蛋白看分子内二硫键的话，非还原条带的电泳条件是多少?

  在非还原性SDS-PAGE（Non-reducing SDS-PAGE）实验中，是否需要煮样取决于你的实验目的和蛋白的特性。

• • 在蛋白质三级结构预测中，核酸序列翻译过来的蛋白质序列里有X，请问这种情况怎么解决呢？网页模型预测可以直接把X删掉吗？

  在蛋白质三级结构预测中，蛋白质序列中的 "X" 代表未知或未确定的氨基酸，直接删除 "X" 可能会影响结构预测的准确性。

• • 请问怎么将蛋白质的肽段拼凑成完整的序列呢？

  在蛋白质研究中，肽段的拼接（peptide assembly）是将质谱、酶解或其他实验方法得到的多个蛋白质片段（肽段）重新组装为完整蛋白序列的过程。这个过程通常涉及生物信息学工具和算法，以下是具体的操作步骤和方法：

• • 请问肽段活性怎么分析呀？

  分析肽段活性通常涉及对肽段的生物活性进行评估或分析，这可以通过多种方法进行，具体取决于你要分析的肽段类型（如酶促反应、受体结合活性等）。以下是一些常见的分析肽段活性的方法：