样品未加够缓冲液直接冷冻，还能补加再煮用吗？

上样缓冲液的不足可能会对样品的完整性和实验结果的可靠性产生一定的影响。我们需要逐步分析这个问题以决定该样品是否还能用，以及如何处理它。

 

一、样品还能不能用？

能用但存在风险，因为第一次加缓冲液太少，变性可能不完全，尤其对于复杂样品（如细胞裂解液）会影响电泳效果。

 

二、能不能补上缓冲液再煮一次？

可以补齐再煮一次，但注意以下几点：

1、补足上样缓冲液的体积；

2、充分混匀，确保残留未溶成分均匀溶解；

3、重新煮沸 95℃、5 分钟，保证彻底变性；

4、短暂离心去泡，再用于 SDS-PAGE。

若用于定量（如WB定量）或要求高一致性实验：不建议使用该样品，因预处理不一致可能引入系统偏差。

 

三、建议

1、如果蛋白样本量充足，建议重新取样再加足上样缓冲液操作，这可以保证实验重复性；

2、如果样品稀有或有限，补齐再煮是可接受的挽救手段，只是结果可能略有影响（如条带略歪、迁移不准等）。

 

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