组织样本液氮速冻之后，冻存管中是否无需加入任何液体？仅将组织单独放入冻存管中，然后依次置于液氮和 -80 ℃ 进行保存吗？

针对组织样本的冻存保存，液氮速冻之后是否需加入液体，需根据后续用途和组织类型具体判断。以下为标准操作的技术要点分析：

 

一、组织液氮速冻后是否需加入液体？

1、若用于 DNA/RNA 提取或蛋白组/代谢组分析：

（1）无需加入任何液体。

（2）正确方法为：组织迅速放入冻存管，立即投入液氮速冻（快速冷冻数秒至完全坚硬），随后立即置于 -80 ℃ 或液氮罐保存。

（3）理由：

• 避免液体存在可能导致反复冻融造成细胞裂解、RNA 降解或代谢物扩散；

• 保证组织原始状态稳定，适用于绝大多数下游分子提取或组学实验。

 

2、若用于细胞活性保存（如干细胞、活组织块植入等）：

需要加入冻存液（含 DMSO、血清等）。此情形需程序降温，而非直接液氮速冻。

 

二、标准操作流程建议（适用于组学类分析）

• 使用干净、预冷的工具处理组织样品；

• 切取后立即剪成合适大小，装入已预冷且标记好的冻存管（推荐<100 mg/管）；

• 快速投入液氮中速冻，至组织完全硬化；

• 置于液氮罐中临时存储，或直接转入 -80 ℃ 长期保存；

 

三、注意事项

• 操作全过程避免组织升温；

• 所使用器具（镊子、冻存管）应提前预冷；

• 长期保存推荐 -80 ℃，避免反复冻融。

 

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