二级质谱可以检测出甲硫氨酸亚砜吗？

二级质谱（MS/MS）可以检测并区分甲硫氨酸亚砜（methionine sulfoxide, MetSO），前提是配合适当的色谱系统和离子源设置。甲硫氨酸（Met）氧化为甲硫氨酸亚砜（MetSO）后，其分子量会增加+16 Da，这是二级质谱很容易识别的典型修饰。

 

一、技术原理

1. 一级MS（MS1）会观测到肽段质量增加 +16 Da，表明Met被氧化；

2. 二级MS（MS/MS）通过断裂谱图可以进一步定位修饰位点，区分是MetSO，还是其他氧化修饰（如Trp氧化、Tyr氧化）；

3. MS/MS断裂过程中，MetSO会产生特征碎片，包括部分丢失CH₃SOH的碎片，便于确认。

 

二、检测要点

1. 离子源类型：ESI（电喷雾电离）或nanoESI，适合蛋白质/肽段分析

2. 质谱类型：Orbitrap、Q-TOF等均可

3. 色谱系统：推荐LC-MS/MS，避免甲硫氨酸氧化的在样本前处理中进一步发生

4. 数据库搜索：设置Met +16 Da为可变修饰（Variable Modification）

5. 质控建议：为避免样本处理过程中人为氧化，建议添加甲硫氨酸保护剂（如甲硫氨酸抑制剂或还原剂）

 

三、注意事项

1、MetSO在CID碎裂中稳定性较低，可能会出现特征的中性丢失（loss of CH₃SOH）；

2、若进行翻译后修饰研究或氧化应激研究，需确保Met氧化是生理相关而非样本处理伪影。

 

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