蛋白分析FAQ汇总

• • 可以检测化学合成吗？

  是的。我们有专门的质谱仪供化学组测试他们的合成产品。质量精度到小数点后两位。如果您想知道机器是如何工作的，那么我们可以解释，但大多数人只想要结果。我们可以向您展示如何打开预制方法并加载样本，然后按“开始”按钮。相关服务:蛋白分析

• • 质谱 (MALDI) 无法获得蛋白质准确的分子质量的可能原因是什么？

  与SDS PAGE显示的质量不同，可能是因为SDS PAGE的准确性的问题。也可能是由于提取方法或基质导致蛋白质破裂。相关服务:蛋白分子量测定

• • MALDI-MS鉴定出的一些蛋白质的序列覆盖率值较低(<30%)，肽质量指纹识别的序列覆盖率是否有标准可接受的值？

  这需要考虑您正在分析的样本是属于模式生物还是非模式生物，因为这会极大地改变游戏规则——尤其是当您正在运行针对数据库进行肽匹配的自动化算法时。相关服务:蛋白质质谱鉴定

• • 来自 RNA/DNA/蛋白质提取试剂盒的蛋白质是否可在 MALDI-TOF MS 中检测？

  原则上是可以的，主要取决于起始材料的量。相关服务:蛋白质质谱鉴定

• • 可以使用 Trizol（Tri-reagent）进行多反应监测 (MRM) 质谱分析的蛋白质提取吗？

  可以。但在进行消化之前，您可能需要进行缓冲液交换。相关服务:MRM/PRM定量蛋白组学分析

• • 在胰蛋白酶消化前，可以通过离心柱对不同大小的蛋白质进行分离吗？

  离心柱通常用于脱盐，即从小分子中分离蛋白质（或其他大分子）。它们通常不用于分离不同的蛋白质。您可以使用 HPLC 或 UPLC 尺寸排阻色谱法，或自上而下的质谱法。相关服务:蛋白分析

• • 为什么抗磷酸酪氨酸抗体容易出现高背景和/或信号减弱的现象？

  检查是否是封阻出现问题。脱脂奶粉适用于所有蛋白印迹，但磷酪氨酸印迹除外，磷酪氨酸印迹具有与膜结合的磷酸化蛋白。用该试剂进行阻断会导致蛋白存在潜在的表位。稀释该溶液中的抗磷酸酪氨酸抗体将占据许多表位，留下较少的抗体可用于检测。因此建议在TBS+吐温20中使用1%的BSA作为阻断溶液。相关服务:

• • 为什么我的抗体活性在蛋白质印迹中会随着时间的推移而降低？

  可能有这些原因：1、使用了不同的样品；2、样品在储存中或反复冻融时降解；3、抗体被污染；4、样品在储存中或反复冻融时降解导致蛋白质转移效率低下。相关服务:蛋白质免疫印迹和电转移服务

• • 仪器对蛋白质鉴定的灵敏度是多少？

  我们已经在 LTQ-FT 仪器上展示了对蛋白质鉴定 的 50 attomole 的灵敏度。这是通过 1 皮摩尔的 BSA 蛋白质标准品消化完成的，然后将 50 attomole 的等分试样注射入柱中。在 Mascot 数据库搜索中鉴定出 8 到 10 个肽。相关服务:蛋白分析

• • 使用 IMAC 纯化鉴定磷酸化需要多少蛋白质？

  通过 IMAC 纯化分离磷酸化肽可能需要 10皮摩尔或更多的磷酸化蛋白质。然而，这取决于磷酸化肽序列。TiO2是用于分离磷酸化肽的一种可替代且非常灵敏的方法。我们可以使用 IMAC（Galium 或 Fe）或 TiO2来富集蛋白质消化后的磷酸化肽。一些磷酸化可能相对不稳定且难以分析。相关服务