蛋白分析FAQ汇总
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在过去,样品是被逐步分析的,即用不同的单一波长(色散)照射样品。而 FT-IR 在一次分析中收集所有波长的光谱数据。在 FT-IR,一个连续光源在很宽的红外波长范围内产生红外光。然后,红外光穿过干涉仪,照射到样品上。与色散测量相比,我们首先获得干涉图,干涉图需要转换为红外光谱。相关服务:蛋白
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• FT-IR——红外光谱和傅里叶变换红外光谱(FT-IR)有区别吗?
FT-IR 首先获得干涉图,干涉图(原始信号)表示光强度不是以波长的函数,而是以干涉仪内镜子位置的函数。因此,必须首先对信号进行傅里叶变换(Fourier-transformed,FT),以产生更熟悉的作为波数函数的红外光谱来表示强度。因此得名“FT-IR”或FTIR。FT-IR光谱不仅采集
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对于分子量测定,我们要求样品在20μM浓度下至少有20μL。且在质谱分析之前需要脱盐,这项服务我们可以提供。 注意:PEG,甘油和洗涤剂不适合质谱分析。在提交样品之前,必须清除这些内容。我们可以尝试对较低体积/浓度的样品进行分析,但不能保证结果。如果您的样品在首选缓冲液之外有稳定性问题或不符
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1.在水中彻底清洗凝胶,确保始终使用手套以避免角蛋白污染。使用以前未用于蛋白质印迹分析的干净容器。 2.将凝胶放在流动罩下的干净载玻片上。 3.尽可能靠近目标条带进行切胶,并放置在EP管中。如果没有流动罩可用,请提供整个凝胶和带注释的图片,图片需详细说明要分析的条带。 4.提交样品以及凝胶的
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• 如何准备用于蛋白质鉴定的下拉(pull-down)样品?
我们需要10μg蛋白质来执行消化和分析步骤。我们可以对洗脱的或附着在磁珠上的蛋白质样品进行消化。所有情况均请提供关于所用诱饵蛋白/抗体的信息。 注意:对于所有下拉实验,至少需要两个样品:您的样品和阴性对照。这使我们能够将相互作用蛋白质与存在的任何污染物蛋白质区分开来。相关服务:Pull-do
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我们需要至少10μg蛋白质。请提供样品的缓冲液组成的详细信息。 注意:PEG,甘油和洗涤剂不适合进行质谱分析,必须在提交样品之前去除。我们可以尝试对较低体积/浓度样品的分析,但不能保证结果。可根据要求使用替代蛋白酶。相关服务:蛋白鉴定
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• 如何准备用于翻译后修饰分析的纯蛋白质/蛋白质复合物样品?
我们要求至少20 μL样品,浓度为 20 μM。请提供样品的缓冲液组分的详细信息。在质谱分析之前需要脱盐,我们可以提供这项服务。相关服务:翻译后修饰蛋白组分析
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TMT-SRM分析通常针对5-50个候选生物标记物进行。相关服务:基于TMT的蛋白质组学分析
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所有样本类型,包括细胞/组织裂解物、体液如脑脊液和血浆等,都可以进行TMT-SRM分析。相关服务:基于TMT的蛋白质组学分析
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• SWATH分析的离子库是如何生成的?其生成方式与Shotgun蛋白质组学或MRM相同吗?
数据库实际上是由数据相关采集(DDA)生成的,也可以称为信息相关采集(IDA)。这种采集模式与鸟枪蛋白质组学相同,但与MRM模式不同。MRM模式用于分子或肽的靶向定量,在生成离子库时没有任何用处。相关服务:SWATH定量蛋白组学服务
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