蛋白分析FAQ汇总
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双向荧光差异凝胶电泳(2D DIGE)有助于蛋白质组(样品中的所有蛋白质)的比较,以确定特定蛋白质水平的差异。在 2D DIGE 中,单个凝胶上可运行两个或多个样品。在电泳之前,每个样品中的蛋白质都用不同的荧光标签标记。然后将得到的2D凝胶在每个荧光团最优的激发和发射条件下成像,为每个样品生
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2D凝胶电泳是蛋白质组学研究的一个核心工具。传统的聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)按大小分离蛋白质;然而,2D PAGE增加了一个额外的步骤,其中蛋白质首先通过等电点分离。 在得到的二维分布中,可以区分多达10000个蛋白质,从而提供样品蛋白质组的概述。比较生物样本之间的蛋白质组具有强大的科学
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2D DIGE实验包括对每个图像进行归一化,识别蛋白质斑点,匹配不同样品中代表相同蛋白质的斑点,量化每个斑点的强度,以及计算每个斑点在被比较样品之间的强度比。代表相同蛋白质的斑点之间强度的差异表明了样品之间蛋白质丰度的变化。相关服务:2D-DIGE定量蛋白质组学
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2D DIGE数据的质量取决于2D凝胶荧光图像的质量。准确鉴定和定义蛋白质斑点,以及准确定量每个蛋白质斑点的强度需要:具有宽动态范围的图像;没有光斑强度饱和的图像;可检测低丰度蛋白质的高灵敏度图像;图像在整个视野中没有位置效应。相关服务:2D-DIGE定量蛋白质组学
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• 2D DIGE凝胶应在何时用Deep Purple染色?
在所有CyDye扫描完成之前,不应使用Deep Purple固定或染色2D DIGE凝胶。在扫描CyDyes之前进行固定会影响定量并导致高背景。相关服务:2D-DIGE定量蛋白质组学
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因为 FPA 测量可以与所有测量技术相结合,所以原则上所有类型的样品都可以通过 FPA 进行分析。气体、液体和其他挥发性物质由于其动力学特性而无法在显微镜下进行分析。相关服务:蛋白质质谱鉴定
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在工业和研究的所有领域都可以找到典型的应用。从微塑料、颗粒和污染物的分析开始,到复杂化学结构的表征,例如生物组织、药品,至多层层压板和漆。简而言之,这种检测器技术于非常高的空间分辨率和大样本区域的分析是必不可少的。相关服务:蛋白质质谱鉴定
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它是一种将高压液相色谱与串联质谱相结合的技术,用于鉴定蛋白质和肽的复杂混合物。它被用于鉴定作为潜在生物标志物的蛋白质,用于药物开发研究,以及在法医学中识别未知化合物。质谱仪还可用于质量控制和质量评估,以及绘制化合物结构。相关服务:蛋白质质谱鉴定
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双向差异凝胶电泳 (2D-DIGE) 是经典二维凝胶电泳最强大的变体,它为二维凝胶电泳增加了同步可视化和高度准确的定量维度。2D-DIGE 可以在同一张二维凝胶上分离用光谱可分辨的 CyDye 荧光(通常是 Cy3 和 Cy5)差异标记的多个蛋白质提取物。通过使用标有 Cy2 的通用内标(实
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LC-MS/MS 仪器是互补的。LC-MS/MS 仪器更灵敏,扫描速度更快,且一天可以分析许多样品。LC-MS/MS 主要用于鉴定和定量低丰度蛋白质,翻译后修饰位点也可以用 LC-MS/MS 定位到蛋白质序列中的特定氨基酸残基。相关服务:蛋白分析
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