蛋白分析FAQ汇总

• • 为什么图像质量对 2D DIGE 很重要？

  2D DIGE数据的质量取决于2D凝胶荧光图像的质量。准确鉴定和定义蛋白质斑点，以及准确定量每个蛋白质斑点的强度需要：具有宽动态范围的图像；没有光斑强度饱和的图像；可检测低丰度蛋白质的高灵敏度图像；图像在整个视野中没有位置效应。相关服务:2D-DIGE定量蛋白质组学

• • 2D DIGE凝胶应在何时用Deep Purple染色？

  在所有CyDye扫描完成之前，不应使用Deep Purple固定或染色2D DIGE凝胶。在扫描CyDyes之前进行固定会影响定量并导致高背景。相关服务:2D-DIGE定量蛋白质组学

• • FPA 测量是否适用于所有样品？

  因为 FPA 测量可以与所有测量技术相结合，所以原则上所有类型的样品都可以通过 FPA 进行分析。气体、液体和其他挥发性物质由于其动力学特性而无法在显微镜下进行分析。相关服务:蛋白质质谱鉴定

• • FPA 的典型应用是什么？

  在工业和研究的所有领域都可以找到典型的应用。从微塑料、颗粒和污染物的分析开始，到复杂化学结构的表征，例如生物组织、药品，至多层层压板和漆。简而言之，这种检测器技术于非常高的空间分辨率和大样本区域的分析是必不可少的。相关服务:蛋白质质谱鉴定

• • 什么是 LC/MS/MS？

  它是一种将高压液相色谱与串联质谱相结合的技术，用于鉴定蛋白质和肽的复杂混合物。它被用于鉴定作为潜在生物标志物的蛋白质，用于药物开发研究，以及在法医学中识别未知化合物。质谱仪还可用于质量控制和质量评估，以及绘制化合物结构。相关服务:蛋白质质谱鉴定

• • 什么是 2D-DIGE？

  双向差异凝胶电泳 (2D-DIGE) 是经典二维凝胶电泳最强大的变体，它为二维凝胶电泳增加了同步可视化和高度准确的定量维度。2D-DIGE 可以在同一张二维凝胶上分离用光谱可分辨的 CyDye 荧光（通常是 Cy3 和 Cy5）差异标记的多个蛋白质提取物。通过使用标有 Cy2 的通用内标（实

• • 你们公司如何使用 LC-MS/MS 仪器？

  LC-MS/MS 仪器是互补的。LC-MS/MS 仪器更灵敏，扫描速度更快，且一天可以分析许多样品。LC-MS/MS 主要用于鉴定和定量低丰度蛋白质，翻译后修饰位点也可以用 LC-MS/MS 定位到蛋白质序列中的特定氨基酸残基。相关服务:蛋白分析

• • 什么样的样品应该提交给公司进行蛋白质鉴定？

  a) 鉴定和注释； b) 定量； c) 翻译后修饰定位； d) 纯度验证； e) 样品中杂质的检测； 可以提交用考马斯、银或 Sypro 染料染色的一维或二维凝胶条带。这些条带将被还原和烷基化，被胰蛋白酶消化，并通过 LC-MS/MS 进行分析。分析过程中生成的 MS/MS 谱图将被搜索比对

• • 你们公司可以检测到的蛋白质的最少量是多少？

  我们可以在 attomole 水平上识别蛋白质。考马斯染色可见的任何蛋白质条带都可在我们的实验室中进行鉴定。相关服务:蛋白分析

• • 如何确信识别是正确的？

  我们采用 SEQUEST 算法使用非常严格的评分系统来识别肽和蛋白质。此外，在接受结果之前，我们具有 20 多年综合经验的经验丰富的质谱师会手动检查数据。相关服务:蛋白分析