蛋白分析FAQ汇总
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HPLC 被广泛用于各行各业,如制药/生物制药中的药物开发,蛋白质组学研究中的精准医学和基因治疗,监控产品制造过程中原材料和成品的质量控制,检测食品和饮料中是否存在杀虫剂和掺假成分。相关服务:蛋白质质谱鉴定
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HPLC的应用涵盖了从小规模研发到大规模生产质量控制的广泛领域。相关服务:蛋白质质谱鉴定
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高效液相色谱 (HPLC) 是一种分析化学技术,用于分离、鉴定和量化液体样品中的半挥发性和非挥发性化合物。制药和生物制药、环境以及食品和饮料等行业使用 HPLC 对化合物进行表征、纯化和定量。相关服务:蛋白质质谱鉴定
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埃德曼测序通常用于对数据库中既没有核苷酸也没有氨基酸序列的新型蛋白质进行测序以进行匹配。埃德曼测序证实了蛋白质N末端和切割位点。此外,当ESI-MS无法获得分子量大于40-80kDa的蛋白质高精度质量时,该方法还用于验证重组蛋白的N端边界。相关服务:基于Edman降解的蛋白N端序列分析
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使用氦可能有两个原因:1、低压混合阀梯度系统会从溶液中抽出气泡,并使泵头失速,氦气吹扫从溶剂中排出空气;2、溶剂储罐用氦气加压,可以帮助溶剂顺利流动。此外,氦或氮也可用作常压电离界面中的雾化器气体,以去除溶剂、挥发性缓冲液,并有助于电离LC废水中的化合物。相关服务:蛋白质质谱鉴定
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需要,因为梯度系统可以控制流速和溶剂/缓冲液的变化,以改进色谱分离。 它们可用于锐化分离和加速色谱柱的重新平衡。相关服务:蛋白质质谱鉴定
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需要尽可能多的去除干扰化合物:如蛋白质沉淀、脂质提取物、过滤或去除细胞和微粒。一些样品需要浓缩,有利于检测稀释样品中的各组分。相关服务:蛋白质质谱鉴定
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• LC-MS分析需要HPLC级溶剂和水吗?需要过滤样本吗?
答案都是肯定的!HPLC级水是最重要的成分。由于非极性有机污染物的共蒸馏,用于HPLC的三重蒸馏水破坏了许多色谱操作,因此必须使用HPLC级溶剂和色谱柱。未经过滤的样品会导致注射器和柱玻璃料堵塞。预混合后过滤流动相将减少泵止回阀和管路的磨损和停机时间。相关服务:蛋白质质谱鉴定
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每种类型的色谱方法都有不同的用途。色谱法的多样性使高效液相色谱具有多功能性。大约80%的分离是利用5-10µm反相色谱完成的。反相色谱可对多种化合物进行高分辨率分离,并可在水流动相中运行。离子交换分离色谱需要盐溶液进行分离,而这在质谱联用中并不常见。尺寸分离色谱具有较低的分辨率和较长的运行时
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每种接口在LC/MS中都各有其用途。离子喷雾最适合中性和非极性化合物;电喷雾最好用于电离极性材料,如蛋白质;纳米喷雾经过优化,能够从微流柱中为极性化合物提供最佳的离子生成,特别是当只有微量样品可用时。相关服务:蛋白质质谱鉴定
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