资源中心

• • GST Pull-down 结合质谱分析蛋白互作：原理、流程与结果解读

  GST Pull-down 结合 LC-MS/MS 可用于验证已知蛋白互作或筛选未知互作蛋白。本文说明 GST 融合蛋白 Pull-down 的原理、实验流程、质谱鉴定、阴性对照、假阳性控制、结果解读和后续验证策略。

• • Glu-C 谷氨酸蛋白酶在蛋白质质谱分析中的作用与酶切策略

  Glu-C 谷氨酸蛋白酶可在蛋白质质谱分析中按谷氨酸或天冬氨酸残基进行酶切，常用于补充 Trypsin、Lys-C 等蛋白酶覆盖不足的问题。本文说明 Glu-C 的酶切特异性、多酶切策略、LC-MS/MS 应用、结果解读和适用场景。

• • 免疫质谱是什么？原理、应用场景与质量控制要点

  免疫质谱将 IP/Co-IP 与 LC-MS/MS 联用鉴定蛋白复合物与相互作用候选；说明流程、Western 对照与 SILAC、轻链等非特异干扰。

• • SDS-PAGE 鉴定目的蛋白：条带含义、分子量判读与质谱衔接

  SDS-PAGE 可按表观分子量分离蛋白并评估条带模式；常与 Western 或胶条/胶点质谱联用确认目的蛋白。说明原理、局限与凝胶到 LC-MS/MS 衔接。

• • 二级质谱图多肽鉴定：MS/MS 谱图如何解析肽段序列与修饰？

  二级质谱图多肽鉴定通过选择肽段母离子并进行二次碎裂，利用 b/y 离子、碎片质量和数据库或 de novo 分析解析多肽序列、结构和翻译后修饰。

• • 蛋白动态磷酸化修饰分析：原理、流程与磷酸化位点解读

  蛋白动态磷酸化修饰分析通过磷酸化肽段富集、LC-MS/MS 和定量蛋白组学比较不同时间、处理或疾病状态下的磷酸化位点变化。本文说明磷酸化修饰的生物学意义、实验流程、定量策略、位点定位和结果验证。

• • Edman 法一次可以测出多少序列？N 端测序长度、限制与替代方案

  Edman 降解法通常可连续读取几十个 N 端氨基酸，常见范围约 60-70 个，通常不超过 100 个。本文说明 Edman N 端测序的原理、读长限制、影响因素、长序列拼接策略，以及何时选择质谱测序或全序列验证。

• • Co-IP 和 Pull-down 足够证明蛋白互作吗？证据强度与验证路径

  Co-IP 和 Pull-down 是研究蛋白相互作用的常用方法，但单独结果通常不足以证明直接、体内、功能性互作。本文比较两种方法的证据强度、局限性、质谱联用、阴阳性对照和后续验证策略。

• • 二硫键鉴定质谱:原理、流程与二硫键定位结果怎么看?

  二硫键鉴定质谱通过非还原酶切、LC-MS/MS、肽图和高分辨质谱确认蛋白或多肽中的二硫键位置、配对关系和游离半胱氨酸。本文说明二硫键质谱法原理、样品处理、结果解读、适用场景和常见限制。

• • 差异质谱分析：如何用定量蛋白组筛选差异蛋白？

  差异质谱分析基于 LC-MS/MS 和定量蛋白组学比较不同样本间蛋白丰度差异。本文说明 Label-free、DIA、TMT/iTRAQ、SILAC、PRM/MRM 等方法的原理、流程、适用场景、统计分析和结果验证。