资源中心

• • 蛋白 De Novo 测序是什么意思？串联质谱如何完成从头测序

  蛋白的一级结构（氨基酸线性顺序）决定其折叠方式和多数生物学功能。蛋白 De novo 测序，也称 蛋白从头测序，指在 串联质谱（MS/MS） 下对目标蛋白进行序列解析，不依赖已知的参考数据库条目，适合新蛋白、数据库匹配困难或需要独立验证序列的样品。

• • 如何利用质谱绘制高尔基体蛋白组图谱？

  在细胞生物学研究中，高尔基体（Golgi apparatus）作为蛋白质加工、修饰与分选的核心细胞器，其功能异常与多种疾病（如神经退行性疾病、癌症）密切相关。近年来，随着质谱技术和蛋白组学的快速发展，科学家已经能够在系统层面解析高尔基体蛋白组成及其动态变化。 一、高尔基体蛋白组研究的意义

• • 如何开展线粒体膜蛋白的蛋白组学研究？

  线粒体作为细胞能量代谢和信号调控的核心细胞器，其功能高度依赖于膜蛋白的精确调控。线粒体膜蛋白不仅参与氧化磷酸化（OXPHOS）、代谢物转运，还在细胞凋亡、免疫调控等过程中发挥关键作用。然而，由于其高度疏水性、低丰度及复杂的膜结构特性，线粒体膜蛋白的蛋白组学研究一直具有较高技术门槛。 一、线

• • 蛋白质谱方法比较：电离方式、质量分析器与应用场景如何选择？

  蛋白质谱方法包括 ESI、MALDI、LC-MS/MS、MALDI-TOF、Orbitrap、Q-TOF、Shotgun、Top-down、PRM/MRM 等。本文比较不同蛋白质谱方法的原理、优势、限制和适用场景，帮助选择蛋白鉴定、分子量测定、序列分析、修饰分析和定量方案。

• • 分泌蛋白质组学和蛋白质组学的区别：研究对象、样品与应用怎么选？

  分泌蛋白质组学是蛋白质组学的分支，重点研究细胞或组织释放到胞外环境的分泌蛋白。本文比较分泌蛋白质组学与常规蛋白质组学在研究对象、样品制备、LC-MS/MS 技术、污染控制、数据解读和应用场景上的差异。

• • MS/MS 测蛋白含量和纯度：原理、适用场景与结果解读

  MS/MS 可通过特征肽段和碎片离子提高蛋白含量、纯度和身份确认的可靠性。本文说明 HPLC-MS/MS、LC-MS/MS、三重四极杆和高分辨质谱在蛋白含量测定、纯度分析、相对定量和质量表征中的应用与限制。

• • 蛋白质 N 端测序：Edman 降解法与质谱法如何选择？

  蛋白质 N 端测序可采用 Edman 降解法或质谱法。本文比较两种方法的原理、适用样品、可读序列范围、N 端封闭影响、全长序列分析和从头测序场景，帮助选择合适的蛋白序列分析方案。

• • De novo 从头测序：未知蛋白和多肽序列如何用质谱解析？

  De novo 从头测序是不依赖参考序列的蛋白或多肽序列分析方法。本文说明质谱从头测序原理、多酶切覆盖、片段拼接、反向验证、适用样品、优势限制，以及未知蛋白、抗体和突变分析场景。

• • 蛋白 C 端测序：方法原理、适用场景与质谱方案怎么选？

  蛋白 C 端测序用于确认蛋白羧基端序列、剪切、缺失和修饰。本文比较羧肽酶法、化学法和基于质谱的 C 端序列分析，说明适用样品、实验流程、优势限制与重组蛋白验证场景。

• • Shotgun 实验能鉴定到目标蛋白吗？检出条件、漏检原因与方案选择

  Shotgun 蛋白质组学可以鉴定目标蛋白，但检出结果取决于目标蛋白丰度、样品复杂度、特征肽段、数据库质量和质谱采集深度。本文解析 Shotgun 是否适合找目标蛋白，以及何时需要靶向质谱验证。