蛋白分析FAQ汇总
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每种类型的色谱方法都有不同的用途。色谱法的多样性使高效液相色谱具有多功能性。大约80%的分离是利用5-10µm反相色谱完成的。反相色谱可对多种化合物进行高分辨率分离,并可在水流动相中运行。离子交换分离色谱需要盐溶液进行分离,而这在质谱联用中并不常见。尺寸分离色谱具有较低的分辨率和较长的运行时
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每种接口在LC/MS中都各有其用途。离子喷雾最适合中性和非极性化合物;电喷雾最好用于电离极性材料,如蛋白质;纳米喷雾经过优化,能够从微流柱中为极性化合物提供最佳的离子生成,特别是当只有微量样品可用时。相关服务:蛋白质质谱鉴定
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四极杆是第一个用于色谱分析的质谱仪,也是实验室系统的主要组成部分,并且价格最低。四极杆可以标记峰值分子量的色谱图。线性离子阱分析仪是最灵活的,允许您确定简单的分子量以及前体和产品碎片研究。它们还可以存储足够的离子,为痕量分析提供良好的灵敏度,并可以捕获特定离子进行碎片分析。对于大分子蛋白研究
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因为APCI接口产生低能离子,通常不会分裂分子离子。在GC-MS中发生碎片化是因为它使用70eV电压使样品电离,而该能量通过分子离子击穿产生碎片。在MS/MS中,离子撞击大气体分子产生的碰撞能量导致碎片化。相关服务:蛋白质质谱鉴定
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• 做蛋白质分离选择MALDI-TOF还是LC-MS/MS?
可能需要结合这两种系统。MALDI-TOF-MS系统用于分析凝胶电泳条带中的蛋白质和胰蛋白酶化肽。如果您正在研究PTM蛋白质,可能需要进行前体和产物扫描以确认肽的身份。相关服务:蛋白质质谱鉴定
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LC-MS系统将为您提供柱峰色谱图,并可提供分离材料及其溶剂络合物的分子量。LC-MS/MS系统将更加昂贵,但可以提供结构信息以确认所分离化合物的特性。相关服务:蛋白质质谱鉴定
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对于任何统计数据,3 个生物学重复是最少的,5 个更好,以防 1-2 变坏。相关服务:组学分析
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• 是否可以将冻干血浆用于代谢组学/脂质组学/蛋白质组学的后验分析?
可以。但请记住,血浆是一种天然产品,因此是可变的。您可能需要一个带有冷藏架的冷冻干燥机,不要在基本的实验室冷冻干燥机上进行冻干。相关服务:蛋白质组学
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我们认为您不需要去除细胞悬液中的死细胞。因为分析结果应该显示细胞培养的真实情况。细胞培养总是含有死细胞。相关服务:组学分析
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• 为什么应该从切割 SDS-PAGE 中制备蛋白质样品用于质谱分析?
SDS-PAGE 是一种在进行质谱分析之前用于降低样品复杂性的方法,可以提高鉴定潜在目标的效率。相关服务:蛋白质质谱鉴定
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