蛋白分析FAQ汇总
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质谱可以敏感的定量报告混合物的生物分子组分的质量。如果两个生物分子具有不同的质量,那么即使它们共同洗脱,它们也会被分解相关服务:蛋白质质谱鉴定
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• 在鉴定或定量复杂生物样品的给定成分方面,样品离子扫描如何优于蛋白质混合物的单四极分析?
在产品离子扫描中,可以在一级质谱中筛选混合物中感兴趣成分的质量,在二级质谱中对其进行碎片化,然后在三级质谱中扫描碎片的质荷比信息。相关服务:蛋白质质谱鉴定
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不是的,阳离子交换树脂在表面上具有阴离子(强酸)基团,如R-SO3-。因此,它将结合净阳离子或表面至少有一些正电荷的蛋白质。它不会结合纯阴离子蛋白质。它不会与pI高于缓冲液pH=7.5的蛋白质结合。相关服务:蛋白质质谱鉴定
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蛋白质外围的阳离子(赖氨酸和精氨酸)基团与树脂上的磺酸盐之间的静电吸引。相关服务:蛋白质质谱鉴定
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可能是多价的。蛋白质表面的赖氨酸基团越多,结合点越多,结合越强。相关服务:蛋白质质谱鉴定
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• 为什么增加NaCl等会降低蛋白与阳离子交换树脂的结合强度?
增加离子强度有利于洗脱蛋白质,Na+ 在溶液中与赖氨酸残基竞争磺酸盐,从而使蛋白与树脂的结合能力减弱。相关服务:蛋白质质谱鉴定
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基于疏水性、溶液中非极性成分粘附或分配到色谱固定相上的油性涂层中的趋势来分离不同的蛋白组分。相关服务:蛋白质纯度分析(分子筛/反相色谱)
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• 离子强度是否会对在100%水性缓冲液中进行的反相色谱分离产生主要影响?
与蛋白质(溶质/分析物)本身的疏水/亲水性质相比,离子强度将仅略微改变反相系统中的保留特性。相关服务:蛋白质纯度分析(分子筛/反相色谱)
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• 不同时期用Label free分析的多组蛋白质样品可否一起进行统计分析?
只要适当地规范化数据可以一同进行统计分析。大多数最新的蛋白质组学搜索工具(例如,MaxQuant,Fragpipe,适当地规范化数据,您的统计测试将是有效的。大多数最新的蛋白质组学搜索工具(例如,MaxQuant,Fragpipe,ProteomeDiscoverer)将校正质量和保留时间漂
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• 对多组织提取的蛋白质进行WB时,条带不均衡归一化是什么原因?
可能是由于移液错误,或者蛋白质从凝胶孔中浸出。相关服务:蛋白质免疫印迹和电转移服务
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