资源中心

• • Edman 法一次可以测出多少序列？N 端测序长度、限制与替代方案

  Edman 降解法通常可连续读取几十个 N 端氨基酸，常见范围约 60-70 个，通常不超过 100 个。本文说明 Edman N 端测序的原理、读长限制、影响因素、长序列拼接策略，以及何时选择质谱测序或全序列验证。

• • Co-IP 和 Pull-down 足够证明蛋白互作吗？证据强度与验证路径

  Co-IP 和 Pull-down 是研究蛋白相互作用的常用方法，但单独结果通常不足以证明直接、体内、功能性互作。本文比较两种方法的证据强度、局限性、质谱联用、阴阳性对照和后续验证策略。

• • 二硫键鉴定质谱:原理、流程与二硫键定位结果怎么看?

  二硫键鉴定质谱通过非还原酶切、LC-MS/MS、肽图和高分辨质谱确认蛋白或多肽中的二硫键位置、配对关系和游离半胱氨酸。本文说明二硫键质谱法原理、样品处理、结果解读、适用场景和常见限制。

• • 差异质谱分析：如何用定量蛋白组筛选差异蛋白？

  差异质谱分析基于 LC-MS/MS 和定量蛋白组学比较不同样本间蛋白丰度差异。本文说明 Label-free、DIA、TMT/iTRAQ、SILAC、PRM/MRM 等方法的原理、流程、适用场景、统计分析和结果验证。

• • 蛋白 De Novo 测序是什么意思？串联质谱如何完成从头测序

  蛋白的一级结构（氨基酸线性顺序）决定其折叠方式和多数生物学功能。蛋白 De novo 测序，也称 蛋白从头测序，指在 串联质谱（MS/MS） 下对目标蛋白进行序列解析，不依赖已知的参考数据库条目，适合新蛋白、数据库匹配困难或需要独立验证序列的样品。

• • 如何利用质谱绘制高尔基体蛋白组图谱？

  在细胞生物学研究中，高尔基体（Golgi apparatus）作为蛋白质加工、修饰与分选的核心细胞器，其功能异常与多种疾病（如神经退行性疾病、癌症）密切相关。近年来，随着质谱技术和蛋白组学的快速发展，科学家已经能够在系统层面解析高尔基体蛋白组成及其动态变化。 一、高尔基体蛋白组研究的意义

• • 如何开展线粒体膜蛋白的蛋白组学研究？

  线粒体作为细胞能量代谢和信号调控的核心细胞器，其功能高度依赖于膜蛋白的精确调控。线粒体膜蛋白不仅参与氧化磷酸化（OXPHOS）、代谢物转运，还在细胞凋亡、免疫调控等过程中发挥关键作用。然而，由于其高度疏水性、低丰度及复杂的膜结构特性，线粒体膜蛋白的蛋白组学研究一直具有较高技术门槛。 一、线

• • 蛋白质谱方法比较：电离方式、质量分析器与应用场景如何选择？

  蛋白质谱方法包括 ESI、MALDI、LC-MS/MS、MALDI-TOF、Orbitrap、Q-TOF、Shotgun、Top-down、PRM/MRM 等。本文比较不同蛋白质谱方法的原理、优势、限制和适用场景，帮助选择蛋白鉴定、分子量测定、序列分析、修饰分析和定量方案。

• • 分泌蛋白质组学和蛋白质组学的区别：研究对象、样品与应用怎么选？

  分泌蛋白质组学是蛋白质组学的分支，重点研究细胞或组织释放到胞外环境的分泌蛋白。本文比较分泌蛋白质组学与常规蛋白质组学在研究对象、样品制备、LC-MS/MS 技术、污染控制、数据解读和应用场景上的差异。

• • MS/MS 测蛋白含量和纯度：原理、适用场景与结果解读

  MS/MS 可通过特征肽段和碎片离子提高蛋白含量、纯度和身份确认的可靠性。本文说明 HPLC-MS/MS、LC-MS/MS、三重四极杆和高分辨质谱在蛋白含量测定、纯度分析、相对定量和质量表征中的应用与限制。