如何确定分子量?
一、什么是分子量?
分子量(Molecular Weight,MW),也称为相对分子质量,是指一个分子的质量与1/12碳-12原子质量的比值,单位为道尔顿(Da)或g/mol。在实际应用中,我们也常关注精确分子质量(Exact Mass),即根据各原子同位素的精确质量计算得出的数值,尤其在质谱分析中尤为关键。
二、常用的分子量测定方法汇总
三、质谱法测定分子量
1、质谱仪的原理
质谱(Mass Spectrometry)通过将分子电离为带电离子,并根据其在电场/磁场中迁移的质量-电荷比(m/z)进行分离和检测。
2、常见适用平台
(1)ESI-MS(电喷雾离子化):适合蛋白质、多肽、代谢物等
(2)MALDI-TOF-MS(基质辅助激光解析电离):多用于蛋白和聚合物
(3)HRMS(高分辨率质谱,如Orbitrap、Q-TOF):可获得精确分子质量,用于分子式推断
四、SDS-PAGE测定蛋白分子量(适用于实验室常规验证)
SDS-PAGE 是基于蛋白质在电场中按大小迁移的原理,借助标准蛋白分子量Marker进行估算。
1、优点
操作简便,成本低。可快速估算蛋白纯度与大小
2、局限
分辨率有限,特别是对相近大小蛋白。糖基化、聚合等修饰会影响迁移行为。
五、如何选择合适的分子量测定方法?
百泰派克生物科技配备先进的质谱平台(包括Orbitrap Exploris、TripleTOF、QqQ等),可针对不同类型的分子提供专业分子量测定服务:
(1)蛋白/多肽/代谢物 一站式分子量分析
(2)提供精确分子式预测与结构注释
(3)可定制LC-MS定量+定性联合方案
(4)附带完整谱图、原始数据与分析报告,支持科研发表
无论是基础化学合成、蛋白质表达验证,还是新药发现中的质量控制,准确测定分子量都是不可或缺的一步。选对合适的方法,将为后续研究打下坚实基础。
百泰派克生物科技--生物制品表征,多组学生物质谱检测优质服务商
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