蛋白分析FAQ汇总

• • WB跑TLR4和NF-kB这两个蛋白 条带反亮怎么办，已经降低二抗的浓度了。actin 是正常的？

  这种情况可能是由于多种原因造成的： 1. 二抗过量：如果你已经尝试降低二抗的浓度，然而问题仍然存在，你可能需要进一步降低二抗的浓度，或者尝试使用不同的二抗。 2. 一抗过量：如果二抗的浓度已经足够低，那么可能是一抗的浓度过高。尝试降低一抗的浓度，看看是否能改善结果。 3. 孵育时间过长

• • 请问有人知道病毒的NP蛋白做WB为什么曝不出来吗？

  如果您在尝试检测病毒的NP蛋白时没有得到预期的信号，可能有以下原因： 1. 抗体选择：Western Blot实验的关键是选择正确的抗体。如果你使用的抗体与目标蛋白的亲和力不强，或者抗体本身的质量问题，可能会导致你无法检测到目标蛋白。建议你检查一下你使用的抗体是否适用于Western Bl

• • wb实验蛋白电泳时，在浓缩胶里溴酚蓝弥散是是怎么回事呀？

  溴酚蓝是一种常用的追踪染料，在SDS-PAGE电泳中用于追踪样品的迁移。它的迁移速度一般与小分子量的蛋白相似，因此可以用来观察电泳过程。   弥散现象的原因 1.胶的浓度：如果浓缩胶的浓度设置得不合适，可能会导致溴酚蓝的弥散现象。 2.电泳条件：电压、电流、缓冲液的pH和组成等都可能影响溴

• • western blot，wb出现这种情况为什么?蛋白跑到了marker上?

  当在Western blot实验中出现蛋白质跑到marker上的情况时，可能有以下几个原因： 1.过度加载样品：如果在Western blot实验中加载了过多的样品，蛋白质可能会超出gel的分离范围，导致一部分蛋白质跑到marker上。这通常发生在样品中含有过高浓度的蛋白质时，或者在加载样

• • WB俩个条带相近，曝光一条条带后，用一抗二抗去除剂清洗后，曝光另一条目的蛋白，结果为什么有俩条条带？

  WB电泳 (Western Blot) 是一种检测特定蛋白质在样本中表达量的实验方法。当你提到两个条带相近，并在曝光一个后尝试清洗以曝光另一个时，仍然观察到两个条带，可能有以下几种原因： 1.不完全去除：使用的一抗二抗去除剂可能未能完全去除首次的抗体，导致再次曝光时仍然检测到残留的信号。

• • 自制多克隆抗体做wb时，抗原条带很单一，但提取的蛋白没有目的条带且有杂带，为什么？

  当自制多克隆抗体在Western blot（WB）实验中出现抗原条带很单一，但提取的蛋白没有目的条带且有杂带的情况时，可能存在以下几个原因： 1.抗体特异性问题：抗体可能不够特异性，导致其与非目标蛋白结合，形成杂带。这可能是由于抗体的交叉反应性或非特异性结合引起的。在这种情况下，建议使用更

• • 如果通过植物中的基因找到互作蛋白要进行WB验证，但是无植物抗体只有动物抗体来做可以吗？还是有别的方法？

  当我们需要验证植物中的基因编码的蛋白与其他蛋白的相互作用时，常用的方法之一是通过免疫印迹（Western blotting，简称WB）进行实验。在WB实验中，我们通常使用特异性抗体来检测目标蛋白的存在与否。对于动物蛋白，我们可以使用动物抗体进行WB验证。然而，如果我们没有植物特异性抗体，只有

• • 蛋白样品室温放一夜会降解吗?

  蛋白质的稳定性在很大程度上取决于具体的蛋白质本身、样品的成分、以及存储条件。但是，对于大多数的蛋白质，在室温下放置一夜都有可能导致降解。 对于重要的蛋白样品，建议在分离和纯化后立即冷冻并在-80°C下保存，或者加入适当的稳定剂或抗蛋白酶剂混合物，并在4°C下短时间储存。如果需要长时间存储，则

• • 做脊髓组织质谱怎么准备组织蛋白？先提蛋白再直接送样吗？

  详细描述了从脊髓组织中提取、净化和准备蛋白质的过程，为质谱分析做好准备。

• • 重复做了三次质谱实验，得到的三次数据中出现定量值为0，应该如何分析呢？

  当在质谱实验中得到三次数据中出现定量值为0时，可以考虑以下几个方面进行分析： 1.检查实验条件和样品处理： 确保实验条件的稳定性，包括仪器的校准和质控样品的使用。 检查样品的处理过程，确保没有发生样品损失或降解。 2.检查质谱仪器和方法： 确保质谱仪器的性能正常，例如检查离子源、质