蛋白分析FAQ汇总

• • western blot，wb出现这种情况为什么?蛋白跑到了marker上?

  当在Western blot实验中出现蛋白质跑到marker上的情况时，可能有以下几个原因： 1.过度加载样品：如果在Western blot实验中加载了过多的样品，蛋白质可能会超出gel的分离范围，导致一部分蛋白质跑到marker上。这通常发生在样品中含有过高浓度的蛋白质时，或者在加载样

• • WB俩个条带相近，曝光一条条带后，用一抗二抗去除剂清洗后，曝光另一条目的蛋白，结果为什么有俩条条带？

  WB电泳 (Western Blot) 是一种检测特定蛋白质在样本中表达量的实验方法。当你提到两个条带相近，并在曝光一个后尝试清洗以曝光另一个时，仍然观察到两个条带，可能有以下几种原因： 1.不完全去除：使用的一抗二抗去除剂可能未能完全去除首次的抗体，导致再次曝光时仍然检测到残留的信号。

• • 自制多克隆抗体做wb时，抗原条带很单一，但提取的蛋白没有目的条带且有杂带，为什么？

  当自制多克隆抗体在Western blot（WB）实验中出现抗原条带很单一，但提取的蛋白没有目的条带且有杂带的情况时，可能存在以下几个原因： 1.抗体特异性问题：抗体可能不够特异性，导致其与非目标蛋白结合，形成杂带。这可能是由于抗体的交叉反应性或非特异性结合引起的。在这种情况下，建议使用更

• • 如果通过植物中的基因找到互作蛋白要进行WB验证，但是无植物抗体只有动物抗体来做可以吗？还是有别的方法？

  当我们需要验证植物中的基因编码的蛋白与其他蛋白的相互作用时，常用的方法之一是通过免疫印迹（Western blotting，简称WB）进行实验。在WB实验中，我们通常使用特异性抗体来检测目标蛋白的存在与否。对于动物蛋白，我们可以使用动物抗体进行WB验证。然而，如果我们没有植物特异性抗体，只有

• • 蛋白样品室温放一夜会降解吗?

  蛋白质的稳定性在很大程度上取决于具体的蛋白质本身、样品的成分、以及存储条件。但是，对于大多数的蛋白质，在室温下放置一夜都有可能导致降解。 对于重要的蛋白样品，建议在分离和纯化后立即冷冻并在-80°C下保存，或者加入适当的稳定剂或抗蛋白酶剂混合物，并在4°C下短时间储存。如果需要长时间存储，则

• • 做脊髓组织质谱怎么准备组织蛋白？先提蛋白再直接送样吗？

  详细描述了从脊髓组织中提取、净化和准备蛋白质的过程，为质谱分析做好准备。

• • 重复做了三次质谱实验，得到的三次数据中出现定量值为0，应该如何分析呢？

  当在质谱实验中得到三次数据中出现定量值为0时，可以考虑以下几个方面进行分析： 1.检查实验条件和样品处理： 确保实验条件的稳定性，包括仪器的校准和质控样品的使用。 检查样品的处理过程，确保没有发生样品损失或降解。 2.检查质谱仪器和方法： 确保质谱仪器的性能正常，例如检查离子源、质

• • 想问一问做免疫共沉淀实验，在加上抗体过夜好？

  当进行免疫共沉淀实验时，是否将抗体过夜取决于实验的具体要求和抗体的特性。下面是一些关键因素需要考虑的： 1.抗体稳定性：不同的抗体具有不同的稳定性。有些抗体在过夜的条件下可能会降解或失去活性。因此，在选择是否将抗体过夜之前，需要对抗体的稳定性进行评估。 2.抗体浓度：过夜的时间越长，抗体

• • 免疫共沉淀到底有啥作用？

  免疫共沉淀（co-immunoprecipitation）是一种常用于检测和分离特定蛋白质与其相互作用的蛋白质复合物的实验技术。这种技术在生物药物研发和生物科技领域中被广泛应用，因为它可以帮助我们了解蛋白质相互作用的机制，从而揭示疾病发生和发展的过程。 免疫共沉淀的基本原理是利用抗体的高度

• • coIP方法检测蛋白质相互作用如何设立阳性对照？

  设立阳性对照是coIP方法中的重要步骤，通过选择已知相互作用的蛋白质对，并进行免疫沉淀和免疫印迹分析等实验，可以验证实验的可靠性和准确性。同时，还需要进行阴性对照实验来排除非特异性的结合和假阳性结果。 阳性对照的设立一般遵循以下的准则： 1.已知的蛋白质互作对：选择一个在文献中已经报道过的