做脊髓组织质谱怎么准备组织蛋白?先提蛋白再直接送样吗?
脊髓组织质谱的蛋白准备流程:
1.组织均质化:
使用冷冻粉碎机或手持组织均质器在冷冻条件下均质化组织。将脊髓组织均质化。一般可以选择含有适当的蛋白酶抑制剂的RIPA缓冲液或其它蛋白提取液来做均质化。
2.蛋白提取:
将均质化的组织样本进行离心,收集上清液。上清液中即为提取的蛋白。
3.蛋白量测定:
使用Bradford、BCA或其他适用的方法来测量蛋白的浓度。
4.蛋白纯化 (可选):
如果样品中有污染物或杂质,可以使用蛋白凝胶电泳等方法对其进行纯化。
5.酶切(可选):
使用特定的蛋白酶(如胰蛋白酶)对蛋白进行消化,生成小的多肽片段。
6.样品清洁(可选):
使用C18柱或其他方法来清除可能对质谱产生干扰的物质。
7.重悬(可选):
将清洁后的样品在适当的溶液中重悬,为后续质谱分析做好准备。
8.提交样品:
准备好的蛋白样品可以送到质谱实验室进行分析。
至于是否需要自己提蛋白然后送样给技术服务公司,这取决于技术服务公司提供的服务范围和详细要求。有的公司提供从样品准备到质谱分析的全套服务,而有的公司可能只做质谱分析,因此需要您提供已经准备好的蛋白样品。最好是在项目开始前详细咨询他们的服务范围和样品要求,这样可以确保您提供的样品满足他们的要求,从而获得最佳的分析结果。
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