western blot,wb出现这种情况为什么?蛋白跑到了marker上?

    当在Western blot实验中出现蛋白质跑到marker上的情况时,可能有以下几个原因:

     

    1.过度加载样品:

    如果在Western blot实验中加载了过多的样品,蛋白质可能会超出gel的分离范围,导致一部分蛋白质跑到marker上。这通常发生在样品中含有过高浓度的蛋白质时,或者在加载样品时没有正确控制样品的体积。

     

    解决方法:

    在加载样品时,应该根据样品的蛋白质浓度和所需分离范围来确定加载的体积。如果样品中含有过高浓度的蛋白质,可以进行稀释后再加载。

     

    2.蛋白质聚集:

    某些蛋白质在电泳过程中可能会发生聚集现象,导致聚集的蛋白质跑到marker上。这通常是由于蛋白质的特性或者实验条件引起的。

     

    解决方法:

    可以尝试在电泳缓冲液中添加一些非离子性的去聚集剂,如SDS(十二烷基硫酸钠),以减少蛋白质的聚集现象。此外,调整电泳条件,如电压和时间,也可能有助于减少蛋白质的聚集。

     

    3.蛋白质迁移异常:

    如果在电泳过程中出现异常,如电场不均匀或电泳时间过长,蛋白质可能会在gel中移动不均匀,导致部分蛋白质跑到marker上。

     

    解决方法:

    确保电泳条件的稳定性,如使用新鲜的电泳缓冲液、正确设置电场强度和时间等。此外,检查电泳装置是否存在问题,如电极的位置是否正确、电极之间是否存在电阻等。

     

    4.蛋白质降解:

    如果样品中的蛋白质已经发生降解,可能会导致蛋白质在电泳过程中移动异常,包括跑到marker上。

     

    解决方法:

    在样品制备过程中,应该注意保持样品的完整性和稳定性,避免蛋白质的降解。可以使用蛋白酶抑制剂或低温处理样品,以减少蛋白质的降解。

     

    百泰派克生物科技--生物制品表征,多组学生物质谱检测优质服务商

     

    相关服务:

    Far-Western Blot分析

    蛋白质相互作用分析

    蛋白质相互作用质谱分析

    免疫共沉淀法(CO-IP)结合质谱联用的蛋白互作分析

    GST融合蛋白Pull-down技术结合质谱联用的蛋白互作分析

    SILAC与免疫共沉淀结合质谱联用的蛋白互作分析

    交联法蛋白相互作用分析

    标记转移法蛋白相互作用分析

    Pull-down靶蛋白质谱鉴定

提交需求
姓名 *
联系类型 *
联系方式 *
项目描述
咨询项目 *

 

How to order?


/assets/images/icon/icon-rc2.png

客服咨询

/assets/images/icon/icon-message.png

提交需求

https://file.biotech-pack.com/static/btpk/assets/images/icon/icon-wx-2.png

https://file.biotech-pack.com/pro//bt-btpk/20241231/config/1874015350579343360-WX-20241231.jpg

联系销售人员

/assets/images/icon/icon-tag-sale.png

促销活动

/assets/images/icon/icon-return.png