蛋白分析FAQ汇总

• • 大家好，最近学习质谱仪，小白一个，想请问为什么ESI离子源，得到的质谱图准分子离子峰是〔M+H〕+?

  电喷雾电离（Electrospray Ionization，简称 ESI）是一种常用的软电离技术，广泛应用于生物大分子（如蛋白质、多肽、核酸等）的质谱分析。在 ESI 的过程中，样品溶液通过一个带电的喷嘴（喷雾针）形成微小的液滴，然后在高电压的作用下进行电离。 为什么是〔M+H〕⁺？ 1

• • 相对分子质量的测定——质谱法中最大质荷比为什么是相对分子质量?

  在质谱法中，最大质荷比（m/z）是指质谱图中离子峰的质量与电荷比值的最大值。而为什么在相对分子质量的测定中，最大质荷比是相对分子质量呢？下面我将逐步解答这个问题。 1.质谱法的基本原理 质谱法是一种通过将化合物分子转化为离子，并对离子进行质量分析的方法。在质谱仪中，化合物样品首先被电离，产

• • 打高分辨质谱，浓度要求是多少？

  样品浓度对高分辨质谱的质量有一定影响，但并没有严格的“一刀切”标准，因为这还取决于多个因素： 1.分析物的性质： 某些化合物或蛋白质更容易被电离，因此可能需要较低的浓度。 2.质谱仪的灵敏度和规格： 不同型号的质谱仪对样品浓度的要求也会不同。 3.实验目的： 例如，定量实验通常需要较高

• • 求助懂质谱MRM的人 ?

  一、MRM是什么？ MRM（Multiple Reaction Monitoring）是质谱技术中的一种定量分析方法，也称为多反应监测。它通过选择特定的前体离子和产物离子对，实现对目标分子的高灵敏度和高选择性的定量分析。 二、MRM的原理是什么？ MRM基于质谱仪的三重四极杆（trip

• • 分子量检测的分析方法有哪些？

  分子量（Molecular Weight, MW）检测是化学、生物化学和分子生物学研究中常用的分析手段。根据所研究物质的性质和需要解决的问题，可以使用多种不同的分析方法： 1.质谱法（Mass Spectrometry）： 质谱法是一种常用的分子量检测方法，它可以通过测量样品分子的质荷比（

• • 多肽的等电点如何计算？

  计算多肽等电点的大致步骤如下： 1.确定多肽的氨基酸组成： 首先，需要确定多肽由哪些氨基酸组成。每种氨基酸都有不同的酸碱性质，这将影响多肽的等电点。 2.确定每个氨基酸的pKa值： 每个氨基酸都有一个特定的pKa值，它表示在酸性条件下，氨基酸中的羧基和氨基的离子化程度。这些pKa值可以从

• • 测定蛋白质等电点的意义是什么？

  蛋白质的等电点（isoelectric point，pI）是指在特定条件下，蛋白质呈现净电荷为零的pH值。测定蛋白质的等电点具有以下重要意义： 1.确定蛋白质的电荷状态： 蛋白质的电荷状态对其溶解性、稳定性、相互作用以及功能等方面具有重要影响。蛋白质在不同pH值下的电荷状态决定了其溶解度和

• • 在蛋白质免疫印迹实验中为什么要用一抗检测目的蛋白后又用二抗进行放射自显影显示?

  在回答这个问题前，我们先说一说蛋白质免疫印迹实验的原理： 首先，目的蛋白会被分离出来并转移到膜上。 然后，膜上的目的蛋白会与特异性的一抗结合。 接下来，一抗与目的蛋白结合的位置会被二抗识别并与之结合。 最后，二抗上的酶或放射性同位素会产生可视化的信号，用于检测目的蛋白的存在与否。 1.

• • 蛋白质纯化的目的是什么？实验步骤？实验原理？

  蛋白质纯化的目的是获得高纯度的目标蛋白质，以便进行进一步的研究和应用，如研究其功能机制和三维结构。蛋白质纯化的方法有多种，不同的纯化方法原理和步骤都不同，详细解释如下： 一、离子交换色谱 (Ion-Exchange Chromatography) 1.原理 根据蛋白质表面带电性与色谱柱上

• • 谁知道蛋白质的分离和纯化的方法啊？

  蛋白质的分离和纯化可以帮助我们获取纯度较高的蛋白质样品，以便进行后续的研究和应用。以下是常用的蛋白质分离和纯化方法： 一、蛋白样品获取： 1.首先，将含有目标蛋白质的细胞或组织破碎，释放出细胞内的蛋白质。 2.然后，通过离心将细胞碎片和细胞器分离出来，得到含有目标蛋白质的上清液。 二