蛋白分析FAQ汇总

• • 求助懂质谱MRM的人 ?

  一、MRM是什么？ MRM（Multiple Reaction Monitoring）是质谱技术中的一种定量分析方法，也称为多反应监测。它通过选择特定的前体离子和产物离子对，实现对目标分子的高灵敏度和高选择性的定量分析。 二、MRM的原理是什么？ MRM基于质谱仪的三重四极杆（trip

• • 分子量检测的分析方法有哪些？

  分子量（Molecular Weight, MW）检测是化学、生物化学和分子生物学研究中常用的分析手段。根据所研究物质的性质和需要解决的问题，可以使用多种不同的分析方法： 1.质谱法（Mass Spectrometry）： 质谱法是一种常用的分子量检测方法，它可以通过测量样品分子的质荷比（

• • 多肽的等电点如何计算？

  计算多肽等电点的大致步骤如下： 1.确定多肽的氨基酸组成： 首先，需要确定多肽由哪些氨基酸组成。每种氨基酸都有不同的酸碱性质，这将影响多肽的等电点。 2.确定每个氨基酸的pKa值： 每个氨基酸都有一个特定的pKa值，它表示在酸性条件下，氨基酸中的羧基和氨基的离子化程度。这些pKa值可以从

• • 测定蛋白质等电点的意义是什么？

  蛋白质的等电点（isoelectric point，pI）是指在特定条件下，蛋白质呈现净电荷为零的pH值。测定蛋白质的等电点具有以下重要意义： 1.确定蛋白质的电荷状态： 蛋白质的电荷状态对其溶解性、稳定性、相互作用以及功能等方面具有重要影响。蛋白质在不同pH值下的电荷状态决定了其溶解度和

• • 在蛋白质免疫印迹实验中为什么要用一抗检测目的蛋白后又用二抗进行放射自显影显示?

  在回答这个问题前，我们先说一说蛋白质免疫印迹实验的原理： 首先，目的蛋白会被分离出来并转移到膜上。 然后，膜上的目的蛋白会与特异性的一抗结合。 接下来，一抗与目的蛋白结合的位置会被二抗识别并与之结合。 最后，二抗上的酶或放射性同位素会产生可视化的信号，用于检测目的蛋白的存在与否。 1.

• • 蛋白质纯化的目的是什么？实验步骤？实验原理？

  蛋白质纯化的目的是获得高纯度的目标蛋白质，以便进行进一步的研究和应用，如研究其功能机制和三维结构。蛋白质纯化的方法有多种，不同的纯化方法原理和步骤都不同，详细解释如下： 一、离子交换色谱 (Ion-Exchange Chromatography) 1.原理 根据蛋白质表面带电性与色谱柱上

• • 谁知道蛋白质的分离和纯化的方法啊？

  蛋白质的分离和纯化可以帮助我们获取纯度较高的蛋白质样品，以便进行后续的研究和应用。以下是常用的蛋白质分离和纯化方法： 一、蛋白样品获取： 1.首先，将含有目标蛋白质的细胞或组织破碎，释放出细胞内的蛋白质。 2.然后，通过离心将细胞碎片和细胞器分离出来，得到含有目标蛋白质的上清液。 二

• • 蛋白纯化过程中遇到蛋白混杂核酸很严重的情况怎么办？（离子交换、核酸酶无法解决）?

  在蛋白纯化过程中遇到蛋白混杂核酸严重的情况，且离子交换和核酸酶无法解决的情况下，可以考虑以下方法来解决这个问题： 1.亲和层析法： 使用特定的亲和基质，如亲和树脂或亲和柱，来选择性地结合目标蛋白。这种方法可以通过蛋白与亲和基质之间的特异性相互作用来分离蛋白和核酸。例如，如果目标蛋白具有特定

• • 蛋白质测序和蛋白质一级结构测定能约等吗？不是的话一级结构测定是什么，两个有什么联系吗？

  蛋白质测序和蛋白质一级结构测定都是描述蛋白质的氨基酸序列的方法，尽管它们在实际应用中常常被交替使用，但这两个术语有微妙的差异： 1.蛋白质测序： 这通常指的是确定蛋白质的氨基酸序列的过程。蛋白质测序可以通过多种方法进行，包括质谱法、Edman降解法和DNA测序等。 2.蛋白质一级结构：

• • 圆二色谱的数据要怎么分析得到各个结构的比例呢？

  圆二色光谱（Circular Dichroism, CD）是一种常用的分析蛋白质或其他生物大分子二级结构的方法，该方法基于蛋白质或其他生物大分子在特定波长的圆偏光吸收差异。下面是一些分析圆二色谱数据的基本步骤和方法，希望可以帮助你： 1.基线校正： 首先需要进行基线校正以去除任何系统噪声或