蛋白分析FAQ汇总
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文章介绍了溶剂标定量和基质标定量的概念、应用、优点和缺点。其中，溶剂标定法在不含待测物质的溶剂中加入标准溶液进行校准，而基质标定法则在含有待测物质的样品基质中加入标准溶液进行校准。
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融合蛋白结构预测是一种挑战性的任务。由于单个蛋白质的三维结构是其功能的一个重要决定因素，因此对融合蛋白，预测其结构对于理解其功能有着重要的影响。 近年来，有一些比较经典和出色的方法被提出解决融合蛋白结构预测的问题。以下是一些主流的方法： 模板匹配法(Template-based mode
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等离子点（pI）是一种用于表征蛋白质的重要参数，它主要表示以下几个方面的特性： 电荷状态：蛋白质分子包含许多可以发生离子化的官能团，比如氨基酸的羧基和氨基，这些官能团的离子化状态直接影响到蛋白质的总电荷。等离子点就是蛋白质分子上，带正电和带负电的官能团数量完全相等，使得蛋白质总电荷为零的
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血清（Serum）是一个复杂的生物样品，其含有数千种蛋白质、代谢物和其他生物分子。使用质谱分析血清样品确实面临一些挑战： 高丰度蛋白的干扰：血清中有几种高丰度蛋白，如白蛋白和免疫球蛋白，它们可能掩盖了低丰度蛋白的检测。很多研究感兴趣的生物标志物通常是低丰度的，因此，高丰度蛋白的存在对于定
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• 想检测一个蛋白质的磷酸化（位点也不知道），市面上没有相应的磷酸化的抗体，要用什么方法检测呢？
检测蛋白质的磷酸化，尤其当磷酸化位点未知且没有相应的磷酸化抗体时，可以考虑以下几种方法： 质谱分析（MS, Mass Spectrometry）: 蛋白质酶解：首先，用适当的酶（如胰蛋白酶）将蛋白质酶解成肽段。 富集磷酸化肽段：使用IMAC (Immobilized Metal Aff
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Western blot (WB) 是用于检测蛋白质水平和修饰的常用技术。当使用特定的抗磷酸化抗体检测蛋白质的磷酸化状态时，你可以从这几个方面对结果进行解读： 1.背景清晰度检查：首先，确保膜上的背景信号很低，使得带子更加清晰可见。如果背景太高，可能是非特异性结合或阻断不完全。 2.确认目
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检测蛋白质磷酸化水平有许多不同的方法，其中最常用的是Western杂交。 1. Western Blot（Western杂交分析） Western Blot是一种允许研究人员检测特定蛋白质在样本混合物中的存在的实验技术。应用于磷酸化的检测时，通过使用针对磷酸化蛋白质的特异性抗体，可以实现对特
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• WB测通路蛋白，只测了磷酸化的蛋白，没有检测总量，问题大不大？
对于这个问题，答案取决于研究的目标以及实验的设计。总体上来说，不同时测定蛋白的总量和磷酸化状态可能对实验结果的解释产生一定影响： 1.基素水平的蛋白质表达量 总蛋白检测可以作为一种控制，了解你的目标蛋白在样本中的基础表达量。如果你的样本中没有总蛋白的检测，你可能不确定观察到的磷酸化水平改变
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在蛋白印迹(Western blot，WB)实验中，确实需要注意一些操作要点以保证实验的准确性和可重复性。以下是一些主要的注意点： 一、样品制备 样品量要恰当：过多或过少的样品均可能影响到实验结果的准确性。 蛋白酶抑制剂的使用：在制备样品过程中应加入蛋白酶抑制剂，防止蛋白被降解。 提取、
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蛋白质泛素化是一种重要的蛋白质修饰过程，它在许多生物学过程中都起着关键作用，包括蛋白质降解、细胞周期调控、基因转录调控、免疫反应和信号传导等。蛋白质泛素化的测定方法有很多种，下面我将详细介绍几种常见的方法： 1.免疫印迹法（Western Blot） 免疫印迹法是最常用的检测蛋白质泛素化的
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