蛋白分析FAQ汇总
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标准曲线在许多实验中都是非常重要的,尤其是在蛋白定量实验中。一个理想的标准曲线应当是线性的,并且具有一个接近于1的r方值(决定系数),这表示测量值与真实值之间有很高的相关性。如果标准曲线的r方值不准确或偏离1,可能会因以下原因: 1.样品制备错误: 如果标准溶液的制备不准确,将直接影响到标
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Bradford法是由Bradford于1976年提出的一种蛋白质浓度测定方法。该方法基于Coomassie Brilliant Blue G-250染料与蛋白质结合时的颜色变化。在没有蛋白质存在的情况下,此染料是红棕色的,但当它与蛋白质结合时,染料会变成蓝色。通过测量吸光度,可以确定蛋白质
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常用的蛋白质测定方法有很多,但以下是几种经常被采用的方法及其原理: 1.Bradford 蛋白定量法 原理: Coomassie蓝G-250染料与蛋白质结合时,染料的吸收峰从465 nm转移到595 nm。与蛋白质结合后的染料吸光度的变化与蛋白质的浓度成正比。 优点: 反应快速,不易受多
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• 流式细胞可以对蛋白绝对定量吗?我想检测一种细胞表面两种膜蛋白的分子数,有什么好的方法吗?
流式细胞仪(Flow Cytometry)是一种用于分析和分离细胞的技术。它可以定性地检测细胞表面或细胞内的标记物,但通常用于相对定量,即比较不同样品之间蛋白的相对表达量。为了实现蛋白的绝对定量,特别是细胞表面的膜蛋白,可以采用以下方法: 1.质谱法: 质谱法可用于绝对蛋白定量,例如多重反
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使用ImageJ进行Western Blot(WB)定量分析的基本步骤如下: 1.导入图像: 打开ImageJ程序,选择‘File’>‘Open’来导入你的WB图像。 2.调整图像大小和对比度: 为了得到最佳的分析结果,你可能需要调整图像的亮度和对比度。选择‘Image’>‘Adjust
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蛋白质、丙氨酸和尿素是生物化学中不同的化合物,它们具有不同的性质和方法来鉴别它们。以下是这三种化合物的简要鉴别方法: 1.蛋白质: 蛋白质是生物大分子,由氨基酸残基组成,通常具有复杂的三维结构和多种功能。蛋白质的鉴别方法通常涉及到生化实验和仪器分析。 一种通用的鉴别方法是使用双硫键还原法(
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紫外吸收法测定蛋白质浓度的基本原理是:蛋白质分子中的芳香氨基酸残基(主要是色氨酸和酪氨酸)和一些其他的结构元素可以吸收紫外光(特别是在280nm附近的波长)。当紫外光通过含有蛋白质的溶液时,蛋白质分子会吸收部分紫外光。通过测量溶液的吸光度(Absorbance,A),可以评估蛋白质的浓度。根
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可以。紫外分光光度法(UV-Vis分光光度法)是用于定量分析氨基酸和蛋白质的常用技术。 1.氨基酸的定量分析: 某些氨基酸,如色氨酸和酪氨酸,本身可以吸收紫外光,特别是在280nm左右。因此,可以直接使用UV-Vis分光光度法对其进行定量分析。但是,对于那些不吸收紫外光的氨基酸,则需要通过
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• 蛋白质和核酸在紫外吸收的原理是怎样的?又有什么差异?带电机理是怎样的
一、紫外吸收的原理: 蛋白质和核酸都可以吸收紫外光。这种吸收是由于其分子中某些部分的π电子和非成对的n电子在吸收一定能量的光后跃迁到高能态所引起的。蛋白质中的芳香氨基酸(如酪氨酸、苯丙氨酸和组氨酸)主要负责紫外光吸收。这些氨基酸中的芳香环有π电子,可以在吸收紫外光后跃迁到高能态。核酸的吸收主
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• western blot如何定量测定细胞中某蛋白表达量?
Western blot(蛋白质印迹法)通常用于定性分析蛋白质的存在以及研究它们在不同条件下的表达变化。其大致步骤如下: 1.样品制备: 使用合适的裂解缓冲液将细胞裂解,并使用蛋白质浓度测定方法(例如BCA或Bradford法)测定蛋白质总浓度。 2.SDS-PAGE: 根据预期的蛋白大
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