蛋白分析FAQ汇总

• • 蛋白与小分子之间的相互作用类型有几种

  蛋白质与小分子间的相互作用非常重要，因为它们通常涉及药物的作用机制、酶的底物识别、信号传导等生物学过程。这些相互作用可以根据不同的力的类型进行分类，主要包括： 1.静电作用（电荷-电荷相互作用）： 这是由相反电荷之间的吸引（例如，阳离子和阴离子之间）或相同电荷之间的排斥引起的。 在蛋白质与

• • 串联质谱法的原理是什么?

  串联质谱（也称为 MS/MS 或 MS2）通过在系列化的两个或更多的质谱分析步骤中分离和检测离子，以获得有关分子的详细信息。这种方法特别适用于鉴定复杂样品中的分子，例如蛋白质、肽或其他有机化合物，并且在生物化学、药物研究、环境科学等领域中有广泛应用。以下是串联质谱的基本原理： 1.离子化：

• • hrms是什么质谱

  HRMS指的是高分辨率质谱（High-Resolution Mass Spectrometry）。这种质谱技术能够以极高的精度测量离子的质荷比（m/z），因此能够准确地确定分子的质量，甚至是非常相似的分子质量也能区分开来。 HRMS具有以下优势： 1.高精度和高分辨率 HRMS的主要优势

• • 你好，我想请教一下我们是给老鼠打了疫苗，然后想扩增它的轻重链，如果用巢式PCR应该怎么进行引物设计呢

  巢式聚合酶链反应（Nested PCR）是一种特殊类型的PCR，用于提高特异性和灵敏度，特别是在模板DNA稀少或含有抑制物时。进行巢式PCR的引物设计时，应考虑以下几个步骤和参数： 1.选择目标序列： 首先，您需要获取老鼠抗体轻链和重链的基因序列。这些序列可以从基因数据库如GenBank中

• • 目的蛋白序列是提供碱基序列还是氨基酸序列？如果提供碱基序列有影响吗？

  目的蛋白序列通常指的是氨基酸序列，因为蛋白质是由氨基酸组成的大分子。在生物学和生物技术研究中，当谈论蛋白质序列时，通常是指特定蛋白质的氨基酸排列顺序。 提供碱基序列也是有价值的，因为碱基序列是编码蛋白质的氨基酸的基因的序列。通过DNA的碱基序列，研究者可以使用生物信息学工具预测编码的蛋白质

• • 请教您如何做pull down蛋白的质谱分析

  一、蛋白质样品准备: 1.在pull-down实验完成后，需要通过多次洗涤步骤清除非特异性结合的蛋白质和其它杂质。 2.使用特定的洗脱缓冲液或直接在SDS-PAGE样品缓冲液中加热，以从亲和树脂或珠子中洗脱目标蛋白质。 二、蛋白质分离（可选，取决于样品的复杂性）: 1.如果样品中可能

• • 请问有检测单糖组成，高效液相色谱的操作方法吗？

  当然，高效液相色谱（HPLC）是一种常用的分析技术，广泛应用于各种样品的成分分析，包括对单糖的检测。以下是一种基本的、用于检测单糖组成的HPLC操作方法： 1.样品准备： 根据您的样品类型（如食品、生物样品等），采取适当的提取和纯化步骤来获取所需的单糖。通常需要通过水解、离心和/或过滤来准

• • O糖修饰及修饰位点分析有具体的检测方案吗

  O-糖修饰（O-Linked Glycosylation）是指糖基通过N-乙酰氨基葡萄糖胺（GlcNAc）、N-乙酰氨基半乳糖（GalNAc）或其他糖类，与蛋白质中的丝氨酸（Ser）或苏氨酸（Thr）残基的氧原子形成共价键的一种翻译后修饰方式。这种修饰在细胞间通信、蛋白质稳定性、免疫识别等过

• • 细胞膜内外两侧结合的蛋白质种类有差异??请解释。

  细胞膜，作为细胞的外界与内部之间的屏障，是由磷脂双分子层和嵌入其中的蛋白质组成的。细胞膜上的蛋白质具有多种功能，如通道、受体、酶和结构蛋白。由于细胞需要响应不同的环境和调节多种细胞内过程，所以细胞膜两侧（外部和内部）的蛋白质种类确实存在差异。 1.位置和功能： 细胞膜外侧的蛋白质主要参与细

• • 为什么疏水性差异的两种蛋白在反相层析和疏水层析上,出峰位置相反呀?

  要理解这个问题，我们要先了解反相层析和疏水层析的基本原理。 一、反相层析 (Reverse Phase Chromatography, RPC) 1.原理： 在反相层析中，固定相（柱填料）是非极性的（如 C18），而移动相（洗脱溶液）是相对极性的，通常基于水/有机溶剂（如乙腈或甲醇）。初