蛋白分析FAQ汇总
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• 蛋白质和核酸在紫外吸收的原理是怎样的？又有什么差异？带电机理是怎样的
一、紫外吸收的原理： 蛋白质和核酸都可以吸收紫外光。这种吸收是由于其分子中某些部分的π电子和非成对的n电子在吸收一定能量的光后跃迁到高能态所引起的。蛋白质中的芳香氨基酸（如酪氨酸、苯丙氨酸和组氨酸）主要负责紫外光吸收。这些氨基酸中的芳香环有π电子，可以在吸收紫外光后跃迁到高能态。核酸的吸收主
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• western blot如何定量测定细胞中某蛋白表达量?
Western blot（蛋白质印迹法）通常用于定性分析蛋白质的存在以及研究它们在不同条件下的表达变化。其大致步骤如下： 1.样品制备: 使用合适的裂解缓冲液将细胞裂解，并使用蛋白质浓度测定方法（例如BCA或Bradford法）测定蛋白质总浓度。 2.SDS-PAGE: 根据预期的蛋白大
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蛋白质样品制备是实验室研究的关键步骤，其目的是获得纯净、功能活跃并适于后续实验分析的蛋白质。以下是蛋白质样品制备技术的一些基本原则： 1.样品处理的一致性： 在整个实验过程中，应该尽量保持样品处理的一致性，以避免引入人为误差。使用相同的方法和条件来处理不同的样品，包括对照组和实验组。 2
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• 做组织样本ELISA时，每个样品提取的蛋白浓度不同，是否需要进行蛋白定量？BCA或者考马斯亮蓝蛋白定量？
当您进行组织样本的ELISA实验时，蛋白浓度的均一性是非常关键的，因为蛋白浓度的差异可能导致结果的不一致性。因此，确实需要对每个样品进行蛋白定量以确保各样品有相同或已知的蛋白浓度。 有多种蛋白定量方法可供选择，其中BCA（双缩氨基酸）和考马斯亮蓝（Coomassie Brilliant B
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火山图是一种用于显示统计学显著性与倍数变化之间关系的图形。在生物信息学中，火山图常用于展示基因或蛋白的表达差异。火山图的x轴代表对数变化（如对数2倍数变化），y轴代表统计学显著性的负对数值（如-log10的p值）。 下面是一个使用ggplot2绘制火山图的基本示例： 在这个示例代码中：
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气相色谱-质谱联用（Gas Chromatography-Mass Spectrometry，简称GC-MS）是一种分析化学技术，主要用于分离、鉴定和定量复杂样品中的化合物。GC-MS结合了气相色谱（GC）和质谱（MS）两种技术，通过串联的方式提供了高度选择性和灵敏度的分析。这一方法广泛应用
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蛋白质样品的制备是一个关键步骤，需要特别注意，因为它可以直接影响后续的分析和实验结果。以下是蛋白质样品制备时需要注意的事项： 1.纯度: 确保所得到的蛋白质是目标蛋白，并且其纯度足够高。可以使用SDS-PAGE等方法来评估蛋白的纯度。 2.浓度: 使用准确的方法（例如布拉德福德、Lo
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一、 材料与试剂准备: 1.鲜菌丝体或冷冻菌丝体样本 2.蛋白提取缓冲液（通常包括：Tris-HCl、NaCl、EDTA、Triton X-100、PMSF等，具体成分可根据目标蛋白的特性进行调整） 3.液氮 4.清洁的研磨器或研磨珠 二、操作步骤: 1.收集鲜菌丝体，用清水清洗
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当研究特定的生物过程、疾病或治疗方法时，经常需要分析在不同条件下表达的差异蛋白。一旦识别出差异蛋白（比如通过质谱法或双向电泳），接下来通常就是对差异蛋白进行进一步分析和解释，以便了解它们在生物过程中的角色和意义： 1.功能注释: （1）使用数据库如UniProt、Gene Ontology
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GO分析，即基因本体论（Gene Ontology）分析，是一个用于解释和代表基因产品在细胞内的功能、细胞成分和生物过程中的角色的方法。GO分析常用于解释高通量的基因或蛋白质数据，如微阵列实验或质谱实验结果。 GO分析通常应用于： 1.差异蛋白或基因: 当研究者想知道在两个或多个不同状态
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