蛋白分析FAQ汇总

• • 为什么蛋白质电泳要竖直电泳？

  竖直电泳（即在垂直方向上进行的SDS-PAGE）是蛋白质电泳的常用形式，其选择与以下因素有关： 1.分离效率： 竖直电泳提供了良好的分离效率和分辨率。随着蛋白质在凝胶中迁移，它们会在垂直方向上分离，从而使得在短时间内可视化多个不同大小的蛋白。 2.多样品同时加载：

• • 蛋白电泳跑的很歪是什么原因？

  蛋白质电泳时出现的歪曲或斜线通常是由多种因素导致的。以下是一些常见的原因及其可能的解决方案： 1.不均匀的电场： 如果电场在凝胶间不均匀，可能导致蛋白质在凝胶中迁移不均匀。确保电极之间的连接良好，并检查是否有任何破损。 2.凝胶的不均匀性： 如果凝胶制备不均匀或出现气泡，可能导致蛋白的迁

• • 怎么看出7种细胞中所表达的蛋白质不同?

  要比较7种细胞中所表达的蛋白质的差异，你可以采用以下方法： 1.二维电泳 (2-DE): 使用二维电泳可以将细胞的蛋白质按照等电点和分子量进行分离。不同细胞类型的2-DE图谱会展现出不同的蛋白质斑点模式。通过对比这些图谱，你可以观察到哪些蛋白质在某些细胞中表达而在其他细胞中不表达。 2.

• • 蛋白质组筛选出大量的差异蛋白以后适合做什么研究

  对于蛋白质组筛选出的大量差异蛋白，可以进行以下几种后续研究： 1.功能鉴定： 对差异蛋白的生物学功能进行深入研究，如其在细胞中的作用、调控网络等。 2.疾病相关性研究： 探讨差异蛋白在特定疾病或生理过程中的角色。例如，某些差异蛋白可能与某种疾病的发病机制、预后或治疗响应性有关。 3.结

• • 什么叫蛋白质的种属差异

  蛋白质的种属差异是指不同物种或种群之间，蛋白质的序列、结构和功能上的差异。这种差异源于生物的进化过程，反映了不同物种的进化关系和它们对特定环境适应的策略。 1. 蛋白质序列的种属差异： 每一个物种都有其特有的基因组，这些基因编码的蛋白质在序列上往往与其他物种存在差异。通过比较蛋白质的氨基酸

• • Western Blotting的实验原理和实验步骤，它和ELISA的区别？在蛋白质测定上什么情况选用什么方法？

  一、Western Blotting 1.实验原理： Western Blotting（Western印迹）是用于检测特定蛋白在样品中的存在及其表达量的技术。其基本原理是先用SDS-PAGE电泳分离蛋白，然后将蛋白转移到膜上（如：聚偏氟乙烯膜），再使用特异性的抗体来检测目标蛋白。 2.实

• • 怎么表征一个细胞上有特定的受体蛋白

  表征一个细胞上有特定的受体蛋白主要目的是验证和量化细胞表面或内部的受体蛋白的存在。下面是一些常用的表征方法： 1.流式细胞术 (Flow Cytometry) 使用特异性抗体标记目标受体，并用流式细胞仪检测和分析细胞中受体的表达水平和细胞数量。 2.免疫荧光/免疫组化 利用特异性抗体和荧

• • 蛋白质变性及其表征

  蛋白质变性是指蛋白质在生物体外或非生理环境下，其原有的三维结构（空间构象）发生不可逆的改变的过程。这通常涉及到蛋白质的二级、三级和四级结构的破坏，但一级结构（氨基酸序列）通常保持不变。蛋白质变性通常通过物理或化学途径诱导，例如温度升高、pH值的改变、机械振动、紫外照射、或是通过加入变性剂（例

• • 如何利用生物信息学筛选靶蛋白的抑制剂

  利用生物信息学筛选靶蛋白的抑制剂是药物发现过程中的一个关键步骤，通常称为虚拟筛选或计算筛选。以下是基于生物信息学筛选靶蛋白抑制剂的基本步骤： 1.靶蛋白结构获取: 从PDB (Protein Data Bank) 或其他相关数据库中获取靶蛋白的三维结构。 如果没有实验结构可用，可以考虑使

• • 怎么利用层析法纯化酶如何确定目的蛋白?

  一、利用层析法纯化酶 层析法基于酶与某种固定相之间的特定相互作用进行分离。以下是利用不同类型的层析法纯化酶的基本步骤： 1.制备样品: 将含有目标酶的细胞或组织进行裂解，得到原始的细胞抽提物。 通常会用超声、高压均质或其他方法裂解细胞。 通过离心去除裂解后的细胞碎片和未破碎的细胞。