蛋白分析FAQ汇总

• • 为什么做western同一批次提取蛋白跑出的条带不一致?

  当进行 Western blot 实验时，同一批次提取的蛋白质跑出的条带不一致可能是由于以下几个因素导致的： 1.电泳条件不一致: 电压或电流的不稳定可能影响蛋白的迁移。 2.凝胶问题： 使用的SDS-PAGE凝胶可能存在问题，如凝胶制备不均匀或者存储时间过长。 3.转膜过程问题： 转

• • 蛋白磷酸化检测方法有哪些？

  以下是一些常用的蛋白磷酸化检测方法： 1.免疫印迹（Western blotting）： 这是一种常用的蛋白质检测方法，可以用于检测蛋白磷酸化状态。首先，将蛋白样品经过电泳分离，然后将蛋白转移到膜上。接下来，使用特异性的抗体来探测磷酸化蛋白。最后，通过化学发光或染色方法来观察蛋白的表达水平

• • 用Co-IP验证出两个蛋白互作，但是其他验证方式却不互作，是不是Co-IP不可靠？

  Co-IP是一种常用的蛋白质相互作用验证方法，但并不是唯一可靠的方法。为了确保结果的可靠性，应该综合考虑Co-IP与其他验证方式的结果，并进行进一步的实验和分析。 Co-IP也存在一些局限性。首先，Co-IP只能检测已知的相互作用蛋白，对于未知的相互作用可能无法发现。其次，Co-IP的结果

• • 蛋白互作的实验方法有哪些？

  当涉及到蛋白质互作的研究时，有多种实验方法可供选择。以下是一些常用的蛋白质互作实验方法： 1.免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation，Co-IP）： 利用特异性抗体捕获目标蛋白质，并检测与之相互作用的其他蛋白质。 2.酵母双杂交（Yeast Two-Hybrid，Y2H

• • 如何研究蛋白质相互作用网络？

  研究蛋白质相互作用网络主要包括以下几个步骤： 1. 数据收集： 实验方法：使用蛋白质互作实验方法（如Y2H、Co-IP、AP-MS等）进行大规模筛查。 公共数据库：利用已有的蛋白质-蛋白质互作数据库（如BioGRID、STRING等）收集数据。 2. 数据整合和清洗： 整合来自不同

• • 蛋白质相互作用的方法怎么选择？

  选择蛋白质相互作用的实验方法时，应考虑以下几个因素： 1. 实验的目的： 筛选未知互作蛋白：如果是筛选未知的互作蛋白，可以使用酵母双杂交（Y2H）或质谱方法。 验证特定互作：如果是验证特定的蛋白质互作，可以使用免疫共沉淀（Co-IP）或生物层析（BLI）。 2. 样品类型： 体内实

• • 研究蛋白质相互作用的哪些方法会产生假阴性？

  研究蛋白质相互作用时，酵母双杂交、免疫共沉淀、表面等离子共振和质谱分析等方法可能都会产生假阴性结果。以下是一些常见的方法和可能导致假阴性结果的原因： 1、酵母双杂交（Y2H）： 酵母双杂交是一种常用的蛋白质相互作用研究方法。然而，由于技术限制，酵母双杂交可能会产生假阴性结果。可能的原因包括

• • 蛋白免疫印迹实验可以检测两种或两种以上的蛋白质吗？为什么？

  蛋白免疫印迹实验可以同时检测多个蛋白质的存在和表达水平。这是因为在实验中，可以使用多个特异性抗体来检测不同的蛋白质。每个特异性抗体都能与目标蛋白质结合形成免疫复合物，并产生相应的信号。通过使用不同的抗体，可以同时检测多个蛋白质。 百泰派克生物科技——生物制品表征，多组学生物质谱检测优质服务

• • 外膜蛋白ompa。十二肽库，怎么用pull down 验证互作啊?

  通过pull down技术验证外膜蛋白OMPA与十二肽库中其他蛋白之间的互作，需要先使用OMPA抗体磁珠复合物将OMPA蛋白从细胞裂解液中捕获，然后通过洗涤和Elution步骤分离和收集特异性结合的蛋白质。最后，使用蛋白质分离和检测技术进行分析，以确定OMPA与十二肽库中的哪些蛋白质发生了互

• • Pull down实验，HIS标签蛋白与his柱结合弱怎么改善？有没有封闭缓冲液使蛋白与his柱封闭？

  当HIS标签蛋白与HIS柱结合弱时，可以采取以下方法来改善结合效果： 1.优化结合条件： 调整结合缓冲液的pH值、离子强度和温度等参数，以优化蛋白与柱子之间的相互作用。可以尝试不同的缓冲液体系，如Tris-HCl、HEPES或PBS等，以找到最适合的结合条件。 2.增加结合时间： 延长蛋