MALDI-TOF (Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization Time-of-Flight) 质谱和 QE (Quadrupole-Orbitrap) 质谱是两种不同的质谱技术,它们在蛋白质检测中的前处理步骤有一些差异。MALDI-TOF的前处理更倾向于直接将样品与基质混合并形成晶体,而QE质谱的前处理则更加侧重于蛋白质或肽段的液相色谱分离和电离。
一、MALDI-TOF 质谱前处理:
1.样品制备:
涉及将蛋白质样品与基质混合。基质在这里起到帮助蛋白质样品吸收激光能量并实现解吸附/电离的作用。
2.斑点化:
混合物被涂布在MALDI板上形成斑点。
3.晶化:
让基质和蛋白质共晶化是关键步骤,这对于实现高效的激光解吸附/电离至关重要。
二、QE 质谱前处理:
1.样品制备:
通常涉及蛋白质消化,如用胰蛋白酶处理,产生肽段,这些肽段随后用于质谱分析。
2.液相色谱分离:
肽段通常需要通过液相色谱(LC)进行分离,以减少样品复杂性。
3.电喷雾电离:
QE质谱常用电喷雾电离(ESI)作为电离源,这需要将样品以液态形式介入。