蛋白分析FAQ汇总

• • 330kd的超大分子量蛋白怎么做western blot？

  对于超大分子量（如330kDa）的蛋白进行Western Blot分析时，可能需要调整一些实验条件以优化分离和转移效果： 1、样品处理： 由于超大分子量蛋白在凝胶中迁移速度较慢，建议在样品处理过程中使用较高的还原剂浓度（如DTT或β-巯基乙醇）来完全还原蛋白。 使用较高的蛋白负载量，以增

• • western blot蛋白跑了好久都没有动怎么办?

  当 Western blot 蛋白质分析出现没有结果或者没有明显的带的情况时，可能是实验过程中出现了一些问题： 1、电源问题： 确保电源已正确连接并且正在工作。 检查电源设置，确保电压和电流设置正确 2、电极方向问题： 确保电极的方向正确。错误的电极方向会导致蛋白质无法正确迁移。

• • 当细胞内某个蛋白或酶与小分子抑制剂结合了，通过western blot是否检测到？抗体还能否与之结合？

  Western blot通过特异性抗体与目标蛋白结合来检测蛋白的存在与表达水平，当细胞内某个蛋白或酶与小分子抑制剂结合后，通过Western blot是可以检测到的。特异性抗体仍然可以与蛋白质的其他区域结合，形成抗原-抗体复合物，并通过化学发光或染色方法进行检测。这些方法可以产生可视化的信号

• • 检验蛋白质的办法有很多，什么时候用Westen blot，什么时候用ELISE呢?是有什么规则嘛？

  Western Blot和ELISA是两种常用的蛋白质检测方法，它们各自有自己的优点和适用场景。 1、Western blot（蛋白质印迹）： 适用情况：Western blot通常用于检测目标蛋白质的存在、相对表达水平以及特定修饰状态，如磷酸化、甲基化等。它可以提供关于目标蛋白质的分子

• • 为什么western blot 大分子蛋白条带呈波浪状？

  Western Blot实验中，大分子蛋白条带呈波浪状（或称为“微笑效应”）是一个常见的问题，这可能是由以下几个因素引起的： 1. 电泳条件： 电压设置：如果运行电泳的电压过高，可能会导致蛋白质迁移过快，从而产生波浪状的条带。 电泳时间：电泳时间过长或过短都可能影响蛋白质的迁移

• • 请问为什么western blot 蛋白质卡在上面跑不下來？

  当进行Western blot 时蛋白质卡在上面跑不下来，可能有以下几个原因： 1. 电泳条件不合适： 电压过低：如果使用的电压太低，蛋白质的迁移速度会很慢，可能看起来像是蛋白质卡住了。 电泳时间不足：如果电泳时间太短，蛋白质可能还没有足够的时间通过凝胶。 2. 凝胶问题：

• • western bolt 配分离胶时分离胶的浓度和目的蛋白的分子量有关还是和一抗蛋白的分子量有关?

  在SDS-PAGE中，分离胶的浓度是根据目的蛋白的分子量来选择的。分离胶的浓度决定了蛋白质在电泳过程中的迁移速度。较低浓度的分离胶适用于较大分子量的蛋白质，而较高浓度的分离胶适用于较小分子量的蛋白质。 一抗蛋白的分子量与分离胶的浓度无直接关系。一抗蛋白的分子量是指用于检测目的蛋白的抗体的分子

• • western blot实验中提取总蛋白时组织匀浆冰上静置一段时间的作用？

  在Western Blot实验中，将组织匀浆在冰上静置一段时间主要是为了防止样品中的蛋白质因温度过高而变性。冰上静置可以帮助保持低温，有助于维持蛋白质的天然结构，防止酶的过度活性，从而确保实验结果的准确性和重复性。 百泰派克生物科技--生物制品表征，多组学生物质谱检测优质服务商 相关服务

• • 最近做Western Blot时，跑胶时有时会有Marker及蛋白丢失的情况，请问这是什么导致的呢？

  当在进行 Western Blot 实验时，出现 Marker 及蛋白丢失的情况，可能是由以下因素导致的： 1.蛋白负载量过低： 在 Western Blot 实验中，通常需要加载足够的蛋白样品以确保检测到目标蛋白。如果负载量过低，可能会导致蛋白在电泳过程中无法被完全转移到膜上，从而导致

• • 做western blot的时候确定蛋白位置可以用丽春红染色确定吗？

  当进行 Western blot 实验时，通常是通过使用特异性抗体来检测目标蛋白的位置。丽春红染色是一种常用的组织染色方法，但在确定蛋白位置方面并不适用。丽春红染色是一种组织染色方法，主要用于观察组织结构和细胞形态，而不是用于确定蛋白质的位置。 百泰派克生物科技--生物制品表征，多组学生物质