蛋白分析FAQ汇总

• • 请问为什么western blot 蛋白质卡在上面跑不下來？

  当进行Western blot 时蛋白质卡在上面跑不下来，可能有以下几个原因： 1. 电泳条件不合适： 电压过低：如果使用的电压太低，蛋白质的迁移速度会很慢，可能看起来像是蛋白质卡住了。 电泳时间不足：如果电泳时间太短，蛋白质可能还没有足够的时间通过凝胶。 2. 凝胶问题：

• • western bolt 配分离胶时分离胶的浓度和目的蛋白的分子量有关还是和一抗蛋白的分子量有关?

  在SDS-PAGE中，分离胶的浓度是根据目的蛋白的分子量来选择的。分离胶的浓度决定了蛋白质在电泳过程中的迁移速度。较低浓度的分离胶适用于较大分子量的蛋白质，而较高浓度的分离胶适用于较小分子量的蛋白质。 一抗蛋白的分子量与分离胶的浓度无直接关系。一抗蛋白的分子量是指用于检测目的蛋白的抗体的分子

• • western blot实验中提取总蛋白时组织匀浆冰上静置一段时间的作用？

  在Western Blot实验中，将组织匀浆在冰上静置一段时间主要是为了防止样品中的蛋白质因温度过高而变性。冰上静置可以帮助保持低温，有助于维持蛋白质的天然结构，防止酶的过度活性，从而确保实验结果的准确性和重复性。 百泰派克生物科技--生物制品表征，多组学生物质谱检测优质服务商 相关服务

• • 最近做Western Blot时，跑胶时有时会有Marker及蛋白丢失的情况，请问这是什么导致的呢？

  当在进行 Western Blot 实验时，出现 Marker 及蛋白丢失的情况，可能是由以下因素导致的： 1.蛋白负载量过低： 在 Western Blot 实验中，通常需要加载足够的蛋白样品以确保检测到目标蛋白。如果负载量过低，可能会导致蛋白在电泳过程中无法被完全转移到膜上，从而导致

• • 做western blot的时候确定蛋白位置可以用丽春红染色确定吗？

  当进行 Western blot 实验时，通常是通过使用特异性抗体来检测目标蛋白的位置。丽春红染色是一种常用的组织染色方法，但在确定蛋白位置方面并不适用。丽春红染色是一种组织染色方法，主要用于观察组织结构和细胞形态，而不是用于确定蛋白质的位置。 百泰派克生物科技--生物制品表征，多组学生物质

• • 做结构蛋白全长过程中构建质粒时发现其保守区域的氨基酸序列有M，可以把M突变掉吗？突变掉会不会影响原蛋白的结构和功能？

  当考虑改变蛋白质的氨基酸序列时，一般需要考虑以下几个因素： 1.功能和结构的影响： 每个氨基酸在蛋白质中都有其特定的作用和位置。突变掉某个氨基酸可能会影响蛋白的三维结构和功能。例如，如果M位于一个结构的关键位置，或者参与某些功能性的互作，那么突变它可能会导致蛋白的功能丧失或结构不稳定。

• • 想咨询一下在计算圆二色谱纵坐标Δε (M-1,cm-1) 单位是什么，以及M的含义

  在化学和物理学中，圆二色谱（Circular Dichroism, CD）是一种测量分子对左旋和右旋圆偏振光吸收差异的技术。通常，CD谱的纵坐标是Δε，其单位通常是M^−1^cm−1。 在这个单位中： M^−1 指的是摩尔逆，即摩尔浓度的倒数。这是因为CD谱通常是在一定浓度的溶液中测量的

• • 蛋白的质谱定性可以用什么软件呢？如果鉴定出来的蛋白量太少可能会和什么有关呢

  在蛋白质质谱分析中，有多种软件工具可用于蛋白质的定性分析，以下是一些常用的软件： 1.Mascot： 是一款广泛使用的商业软件，由Matrix Science开发。它可以匹配来自多种质谱技术的数据，并与多个蛋白质数据库进行比较。 2.SEQUEST： 最早由John Yates III开

• • 有O糖修饰分析的详细工作流程吗？

  O糖修饰，也称为O-糖基化，是一种在蛋白质的酮基氨基酸上发生的糖类修饰。与N-糖基化不同，O-糖基化的糖类结构和连结方式更为多样。分析O-糖基化修饰的实验步骤通常较为复杂。以下是一个基本的实验流程，具体的步骤和方法可能会根据实验需求和条件进行调整： 蛋白质提取： 使用适当的提取缓冲液从

• • 蛋白质SUMO化鉴定Sumo需要切除吗

  在研究蛋白质的SUMO化（Small Ubiquitin-like Modifier，小泛素样修饰）修饰时，不一定总是需要切除SUMO分子： 1.如果目的是检测蛋白质是否被SUMO修饰： 使用Western Blot实验来检测蛋白质的SUMO化状态时，不需要切除SUMO分子，因为SUMO