蛋白分析FAQ汇总
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• Pull down检测有什么优势?用Western Blot吗?
Pull Down检测的优势: 特异性强:Pull down验证一个蛋白是否与另一个特定蛋白互作时,由于使用的是特异性高的抗体,检测结果的特异性比较强,降低了假阳性的风险。 简单快速:Pull down实验相对一些复杂的肽段互作分析,操作更加简洁和快速,而且易于大量重复实验,检测结
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在IP-MS(免疫沉淀-质谱)数据中,转染的目的蛋白丰度较低是可能的,这可能是由多种因素导致的。比如: 1.转染效率:转染效率是影响目的蛋白丰度的关键因素。如果转染效率较低,那么目的蛋白的表达量也会相应较低。因此,优化转染条件以提高转染效率是非常重要的。 2.蛋白稳定性:目的蛋白的稳定性
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• 在蛋白互作研究中,蛋白质芯片和co-IP,谁更有优势呢?
蛋白质芯片和co-IP(共沉淀实验)都是在蛋白质互作研究领域广泛应用的技术。它们各自具有其优点和局限性,我们可以根据实验需求选择使用哪一种。 一、蛋白质芯片(Protein microarrays): 1.优点 蛋白质芯片一次可以分析千上万种蛋白质样品的相互作用。它以高通量、高效
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• 做WB实验,蛋白电泳,蓝色指示剂有时候是很细的条带,有时候弥散成很宽的条带,这是为什么呢?
这个问题是关于Western blot实验中,电泳跑胶过程的把控以及染色效果的疑惑。如果你注意到你的蓝色指示剂有时候呈现很细的带状,有时候弥散成很宽的带,这可能跟多个因素有关。我会列举每一个可能的原因,并给出相应的解决策略。 1.样品处理不当:如果蛋白样品没有充分的显色,或者显色不均匀,会
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双向电泳在蛋白质组学中有着重要的应用,它的运用可以大幅提高蛋白质分析的复杂度以及分辨率。以下是关于其在蛋白质组学中的几个主要应用: 1.蛋白质分离和鉴定:使用双向电泳,我们可以根据蛋白质的等电点和分子量来进行分离。在第一维中,以等电点为分离基准;在第二维,按分子量分离。这种方法可以分离出数
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• LC-MS中m / z 524.739(电荷2+)的峰值是多少?
在LC-MS中,m/z值表示质量与电荷比。给定的m/z值为524.739,电荷(z)为2+。为了计算此离子的质量(m),需要使用以下公式: 质量(m)=(m/z值)* 电荷(z) - 电荷(z)* 质子质量 质子质量约为1.007276 amu(原子质量单位)。根
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• 蛋白从头测序新突破,Rapid Novor 实现世界首例多抗蛋白全序列直接测序,有何科研意义?
Rapid Novor公司实现的多抗蛋白全序列直接测序技术是一个重要的突破,具有广泛的科研意义。这种从头测序(De Novo Sequencing)方法可以直接获得多肽或蛋白质的氨基酸序列,而不依赖已知的蛋白质数据库。以下是这项技术突破在科研中的一些潜在应用: 1.新蛋
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LC-MS(液相色谱-质谱联用)是一种将液相色谱(LC)与质谱(MS)结合的分析技术。LC-MS定量的原理包括液相色谱对样品进行分离,质谱对分离后的组分进行检测和定量。以下是LC-MS定量原理的主要步骤: 1、液相色谱分离:在LC-MS系统中,首先利用液相色谱对样品中的
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• 凝胶内的蛋白样品是否可以长期保存?如何运输?对质谱鉴定有何影响?
凝胶内的蛋白样品可以在适当的条件下长期保存,但需要注意以下事项: 1.保存条件:将凝胶片存放在4°C或更低的温度下,以减缓蛋白质降解。将凝胶片用塑料包装膜密封,并在凝胶片周围加入适量的湿润纸巾,以防止凝胶片干燥。另外,可以考虑将凝胶片浸泡在含有50%甘油的缓冲液中,以进
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蛋白质质谱分析过程中可能会出现不同来源的污染物,这些污染物可能会干扰质谱信号,影响实验结果的准确性和可靠性。以下是一些常见的蛋白质质谱污染源及其原因: 1、样品污染:样品来源、提取、纯化和处理过程中可能引入各种污染物。常见的污染物包括蛋白酶、脱氧核酸酶、其他非目标蛋白质
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