蛋白分析FAQ汇总

• • 蛋白质结构分析有哪些方法？

  蛋白质结构分析是一个复杂且多方面的领域，涉及许多不同的技术和方法。以下是一些主要的蛋白质结构分析方法，包括每种方法的工作原理、优点和局限性。 一、圆二色谱 1.工作原理： 通过测量蛋白质对圆偏光的吸收来推断蛋白质的二级结构 2.优点： 无需标记: CD不需要对样品进行任何化学修饰或标

• • 免疫共沉淀是不是就是分析抗原1加（抗抗原1的）抗体1加（抗抗体1）抗体的技术呀？

  免疫共沉淀（Immunoprecipitation, IP）是一种用于研究蛋白质之间相互作用的实验技术。按照你的理解，确实涉及到抗原1、抗体1和抗抗体1，详细解释如下： 1. 目标蛋白质的识别： 免疫共沉淀的第一步是识别目标蛋白质，也就是你所说的抗原1。这个蛋白质可能是你正在研究的蛋白质，

• • 为什么在凝胶过滤层析时如果加的样品体积过多会出现叠峰的现象？

  凝胶过滤层析（也称为凝胶渗透层析或分子筛层析）是一种常用的生物化学技术，用于分离不同大小的分子。在这个过程中，如果加入的样品体积过多，可能会出现叠峰的现象。这主要是由以下几个因素引起的： 1. 样品的分布： 在凝胶过滤层析中，样品的分子会根据其大小在凝胶矩阵中分布。较大的分子无法进入凝胶颗

• • 如何通过阅读质谱图来得出化合物/物质的名称？

  质谱图是一种图形表示，横轴代表质量/电荷比（m/z），纵轴代表相对丰度。每个峰代表一个离子，峰的位置表示该离子的m/z值，峰的高度表示该离子的相对丰度。 1. 识别分子离子峰： 分子离子峰（M+峰）通常是质谱图中m/z值最大的峰，代表未发生断裂的分子离子。这个峰可以提供化合物的分子质量信息

• • 怎样用Western blot检测目标蛋白质?

  Western blot通过将蛋白质样品经过SDS-PAGE电泳和膜转移，然后使用特异性抗体进行结合和检测，可以定量分析目标蛋白质的表达水平。Western blot实验的大致步骤包括样品制备、蛋白质定量、电泳分离、膜转移、抗体结合和检测等，以下是一些详细步骤和注意事项： 1.样品制备：

• • 测蛋白质结构x衍射准还是核磁共振准？

  X射线衍射和核磁共振是蛋白质结构研究中的常用方法，它们各有优缺点，准确性方面两者都能达到很高的标准，但适用的情况不同： 一、X射线衍射： X射线衍射是一种常用的测定蛋白质结构的方法。它通过将蛋白质晶体暴露在X射线束中，利用晶体对X射线的衍射来确定蛋白质的结构。 1.优点： 可以解析非常

• • 蛋白质sds聚丙烯酰胺凝胶电泳及分子量测定实验如何选择最佳凝胶浓度与缓冲液的pH？

  1.凝胶浓度的选择： 凝胶浓度的选择应该根据待测蛋白质的分子量范围来确定。一般来说，较低的凝胶浓度适用于较大分子量的蛋白质，而较高的凝胶浓度适用于较小分子量的蛋白质。 通常，常用的凝胶浓度范围是8-15%。对于较大分子量的蛋白质，可以选择较低的凝胶浓度，如8%。对于较小分子量的蛋白质，可以

• • 为什么SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳可以用于提纯蛋白质?

  SDS-PAGE电泳是一种常用的蛋白质分离和纯化技术。它的原理是利用SDS（十二烷基硫酸钠）和聚丙烯酰胺凝胶的特性，将蛋白质样品分离成不同大小的带状条带，从而实现蛋白质的纯化。 1.SDS的作用： SDS是一种表面活性剂，它能够与蛋白质分子中的氢键和疏水相互作用，使蛋白质分子展开成线性结构

• • 免疫共沉淀使用的蛋白必须含有标签（Flag、HA）吗？

  在免疫共沉淀（immunoprecipitation）实验中，通常需要使用特定的抗体来识别和富集目标蛋白。这些抗体可以与目标蛋白结合，并通过沉淀的方式将目标蛋白与其结合的蛋白一起富集出来。在某些情况下，为了更好地进行免疫共沉淀实验，目标蛋白可能需要含有特定的标签，如Flag标签或HA标签。

• • SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质分子量时，迁移距离如何测量？

  SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）是常用的分析蛋白质大小（分子量）的方法。在SDS-PAGE实验后，可以通过测量蛋白质在凝胶中的迁移距离来估算它们的分子量。 使用图像分析软件（例如ImageJ或其他分析软件）或标尺来测量蛋白质迁移的距离，即从点样孔到蛋白质带状条纹的距离。 如