蛋白分析FAQ汇总

• • 请问怎么用高效液相识别水体中蓝绿藻的演替呀

  蓝绿藻演替主要是指不同种类蓝绿藻在水体中的优势地位随环境变化而发生的变化。使用HPLC进行此类研究的一般步骤如下： 1.样品采集： 从不同的水体或同一水体的不同时间点收集水样。 2.样品处理： 通过离心、过滤等方法从水样中分离藻类。 使用有机溶剂（如甲醇、乙腈或丙酮）提取藻类中的色

• • 怎么验证两蛋白内源性相互作用啊

  验证两个蛋白之间的内源性相互作用可以通过多种生物化学和细胞生物学方法： 1.免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation, Co-IP）: 这是一种常用的方法，通过使用针对一个蛋白质的特异性抗体来捕获该蛋白质及其可能的相互作用伙伴。如果另一个蛋白质也被沉淀下来，这表明两者之间可

• • sumo融合蛋白为什么在镍柱上酶切切不掉标签？

  这种情况可能由几个因素引起： 1.酶的活性不足： 使用的酶可能活性不高，或者已经失活。酶的活性可以受到多种因素影响，包括储存条件、温度、pH值等。建议检查酶的质量和储存条件，或者尝试使用新鲜的酶。 2.酶的浓度不足： 可能酶的添加量不足，无法充分与蛋白接触或者达到足够的酶切效率。增加酶的

• • ip 实验求助！input组目的蛋白为双条带，ip组拉下来是单条带！

  在免疫沉淀（Immunoprecipitation, IP）实验中，如果在input（输入）组中观察到目标蛋白为双条带，而在IP组中只拉下单条带，可能是由于： 1、蛋白修饰： 在Input组中，目的蛋白可能存在不同的翻译后修饰形式（如磷酸化、糖基化等），导致电泳迁移速度不同，形成双条带。而

• • sevga法脱蛋白，可以用抽滤除去蛋白沉淀吗？

  可以的，Sevag法通常用于在含有蛋白质的液体样品中去除蛋白。这种方法涉及到使用氯仿和异丙醇的混合溶剂，通过分解蛋白质来清除它们。而DNA或RNA等核酸则留在水相中。在此过程中，样品中的蛋白质与氯仿和异丙醇反应，形成沉淀，然后可以通过抽滤或离心分离出来，从而清除样品中的蛋白质。 百泰派克生

• • 用质谱检测氨基酸的浓度为什么需要很高

  使用质谱（Mass Spectrometry, MS）检测氨基酸需要较高的浓度主要是因为： 1.检测限制： 质谱仪的检测灵敏度限制了它能检测到的最低浓度。对于一些设备，尤其是旧设备或分辨率较低的设备，可能需要更高的样品浓度才能获得可靠的信号。 2.信号强度： 氨基酸的信号可能相对较弱，尤

• • p62蛋白两条带可以用嘛？是p62蛋白被修饰了吗？

  当Western Blot分析中观察到p62蛋白出现两条带时，这可能表示p62蛋白发生了一种或多种形式的翻译后修饰。 第一种情况：P2蛋白发生了翻译后修饰 p62蛋白可能经历了磷酸化、泛素化、糖基化等翻译后修饰，这些修饰可以改变蛋白质的迁移率，导致电泳时出现多个条带。例如，磷酸化会使蛋白质

• • 转膜以后没封闭，pvdf膜存4℃冰箱前没晾干有啥后果？

  将PVDF膜（聚偏氟乙烯）转膜后直接放入4℃的冰箱而不进行晾干，可能会带来几个潜在的问题： 1.水分残留： 如果膜上有水分残留，低温条件可能导致水分凝结，这可能会影响膜的物理结构和性能。 2.膜结构改变： PVDF膜在潮湿条件下可能发生结构上的改变，这可能会影响其后续的应

• • 做WB时，小kd的条带跑出来是倒u型弯曲，稍大些kd的是正常的，为什么呢，是胶没配好，还是电泳夹子是漏的？

  在蛋白质凝胶电泳（Western Blot, WB）中，如果小分子量（小kd）的蛋白条带出现倒U型弯曲，而较大分子量（大kd）的蛋白则正常，这可能是由几个因素引起的： 1.凝胶问题： 如果凝胶制备不均匀或者在聚合过程中发生了问题，可能会导致蛋白质在电泳过程中不均匀迁移。比如，凝胶中的交联密

• • 如何确定参与蛋白质相互作用的氨基酸序列

  确定参与蛋白质相互作用的氨基酸序列是一个复杂的过程，通常涉及以下步骤： 1.蛋白质相互作用鉴定： 使用技术如酵母双杂交、共免疫沉淀（Co-IP）、质谱分析等来初步鉴定相互作用的蛋白质。 这可以提供有关哪些蛋白质可能相互作用的信息，但并不直接提供相互作用的精确氨基酸序列。一旦确定了可能相互