蛋白分析FAQ汇总
-
• 为什么有些蛋白在肿瘤组织中高表达却在血液中低表达或检测不到？
蛋白质在肿瘤组织中高表达而在血液中低表达或检测不到的现象可能由多种因素引起： 1.组织特异性表达： 有些蛋白质可能在特定组织中高表达，如肿瘤组织，但在血液中的表达水平较低。这是由于蛋白质的生物学功能和表达调控机制决定的。 2.血液稀释效应： 即使肿瘤细胞产生大量的特定蛋白质，这些蛋白质释
-
在进行SDS-PAGE时，通常会在凝胶的一侧跑一个分子量标准（Molecular Weight Marker），这是一系列已知分子量的蛋白质。这些标准蛋白质在电泳后会形成一系列条带，每个条带对应一个特定的分子量。 将样品和分子量标准一起进行SDS-PAGE电泳，电泳结束后，观察样品在凝胶上
-
免疫共沉淀（Co-IP）实验后通常不适合直接用于定量比较，因为此技术主要用于检测蛋白质间的相互作用，而不是蛋白质的表达量。Co-IP更多地被视为一种定性方法，用于确认蛋白质之间是否存在相互作用。 如果需要进行定量比较，可以考虑使用免疫印迹（Western Blot）等其他方法来补充Co-I
-
• 求问WB 的目的蛋白分子量160kDa，转膜条件怎么设定
在进行Western Blot（WB）分析时，如果目标蛋白的分子量为160 kDa，转膜条件应该注意以下几点： 1.膜材料： 对于大分子蛋白（如160 kDa），通常推荐使用PVDF（聚偏氟乙烯）膜，因为它具有更高的蛋白结合能力。 2.转膜缓冲液： 使用含有适量甲醇的转膜缓冲液。甲醇有助
-
• 用sephadex g-100纯化蛋白柱子很堵，流速极其慢，请问怎么解决？
使用Sephadex G-100纯化蛋白时，如果遇到柱子堵塞和流速极其慢的问题，可以尝试以下几种方法来解决： 1.检查柱子的装填： 确保Sephadex G-100介质在装填时均匀且没有空气泡。如果存在空气泡或装填不均，柱子的流动性会受到影响。 2.调整样品的体积和浓度：
-
• WB实验中，GAPDH正常，阳参也正常，就是样品组目的条带不出来是什么原因引起的，有没有大佬有过类似的问题
如果出现以上情况可能有以下几种原因： 1.目的蛋白的表达水平低： 如果样品中目的蛋白的含量非常低，可能无法被检测到。这可能是由于样品的本质特性或样品处理过程中蛋白丢失引起的。 2.抗体特异性问题： 使用的一抗或二抗可能对目的蛋白的识别能力不足。确保抗体的特异性和活性。如果可能，尝试更换抗
-
• WB结果分子量增加了20kDa,怎么去磷酸化、去糖基化来验证翻译后的修饰
Western Blot（WB）实验中，若观察到某蛋白的分子量相比预期增加了20kDa，这可能表明该蛋白经历了翻译后修饰。为了验证这一点，你可以采取以下步骤： 一、去磷酸化验证 1.样品准备： 首先，确保你有足够的蛋白样品。 2.选择适当的磷酸酶： 通常使用碱性磷酸酶（如Lambdap
-
在进行Western Blot（WB）实验之前，有几个关键准备工作需要完成： 一、实验设计: 确定目的蛋白和合适的抗体（一抗和二抗） 选择合适的加载对照（如GAPDH、β-actin等） 确定样品类型（细胞裂解物、组织提取物等） 二、样品准备: 收集和制备
-
蓝绿藻演替主要是指不同种类蓝绿藻在水体中的优势地位随环境变化而发生的变化。使用HPLC进行此类研究的一般步骤如下： 1.样品采集： 从不同的水体或同一水体的不同时间点收集水样。 2.样品处理： 通过离心、过滤等方法从水样中分离藻类。 使用有机溶剂（如甲醇、乙腈或丙酮）提取藻类中的色
-
验证两个蛋白之间的内源性相互作用可以通过多种生物化学和细胞生物学方法： 1.免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation, Co-IP）: 这是一种常用的方法，通过使用针对一个蛋白质的特异性抗体来捕获该蛋白质及其可能的相互作用伙伴。如果另一个蛋白质也被沉淀下来，这表明两者之间可
How to order?
