蛋白分析FAQ汇总

• • IP-MS和Co-IP MS有什么区别吗

  IP-MS（免疫共沉淀质谱分析）和Co-IP MS（共免疫共沉淀质谱分析）都是研究蛋白质相互作用的技术，主要区别在于目标蛋白质的选择和识别过程： 1.IP-MS： 先通过特异性抗体与目标蛋白质结合，形成抗体-蛋白质复合物，然后通过沉淀这些复合物，再利用质谱技术对沉淀物中的蛋白质进行鉴定。这

• • 差异表达蛋白质统计分析中，怎么知道最显著的那个蛋白是什么？

  要确定哪个蛋白质在差异表达分析中最显著，关键在于查看统计分析的结果。具体来说可以： 1.查看调整后的P值： 统计分析结果通常会列出每个蛋白质的调整后P值。最显著的蛋白质是那个具有最低调整后P值的蛋白。 2.考虑表达量变化幅度： 对于具有最低P值的蛋白质，还需考虑其表达量变化的幅度（如

• • WB膜可以质谱吗？

  是的，Western Blot（WB）膜上的蛋白质可以用于质谱分析。在Western Blot过程中，蛋白质被转移到PVDF或硝酸纤维素膜上，之后这些蛋白质可以从膜上切下，再进行酶解，最后进行质谱分析以确定蛋白质的身份或进行进一步的表征。 百泰派克生物科技--生物制

• • 交联法蛋白相互作用分析中，使用交联剂处理细胞后要用loadingbuffer然后煮吗？

  是的，在交联法蛋白相互作用分析中，提取蛋白后通常需要加入loading buffer，并进行煮沸处理。这个步骤是为了使蛋白质变性，以便于后续进行SDS-PAGE电泳分析。 百泰派克生物科技--生物制品表征，多组学生物质谱检测优质服务商 相关服务： 交联法蛋白相互作用分析 蛋白质相互作用分

• • 有了多肽序列，怎么检测这个多肽可不可用？

  检测多肽的可用性通常涉及对其生物学性质、稳定性、纯度和功能性的评估： 1.纯度检测： 高效液相色谱（HPLC）：用于检测多肽的纯度，即多肽样品中目标多肽的百分比。 质谱（MS）：用于确定多肽的分子质量，进一步确认其纯度和结构。 2.生物活性检测： 体外实验：如酶抑制测定、受体结合实

• • 交联法蛋白相互作用分析中，使用交联剂处理细胞后要用ripa裂解吗

  在交联法蛋白相互作用分析中，使用交联剂（如甲醛或双硫仑）处理细胞后，通常需要用RIPA缓冲液或其他蛋白裂解液进行裂解。这一步骤是为了破坏细胞膜和释放细胞内的蛋白质，使之能够在后续的分析中被检测。RIPA缓冲液能有效地裂解细胞和组织，释放蛋白质，并保持交联的蛋白质复合物稳定。 百泰派克生物科

• • 样品在-20℃存放3个月，对检测会有影响吗？

  对于大多数生物学和化学样品，-20℃的存储在三个月内一般不会对检测结果产生显著影响。当然，具体情况还是取决于样品类型和检测方法。生物样品（如DNA、RNA、蛋白质）通常可以在-20℃下长期存储而不影响后续的分子生物学检测，如PCR、西方印迹或酶联免疫吸附测定（ELISA）。然而，重复的冻融循

• • 提豆酱多肽里面还有食盐，需要脱盐吗？怎么脱呢？

  从豆酱提取的多肽中如果含有食盐，通常情况下是需要脱盐的。这是因为食盐（氯化钠）可能会影响多肽的纯度和稳定性，尤其是在用于某些特定的生物学或化学分析时。脱盐可以通过多种方法进行，主要的脱盐技术包括： 1.透析法： 这是一种常见的脱盐方法，通过使用半透膜来分离小分子的盐和大分子的多肽。透析袋中

• • 做蛋白组分液相分析，溶剂是0.1%TFA，流动相是0.1%TFA与乙腈，但是5min内总是会出现远远高于目标峰的峰是为什么呀？

  在蛋白质组学的液相色谱分析中，如果在5分钟内出现远高于目标峰的峰，这种情况有几个可能的原因： 1.系统峰或基线漂移： 在分析的初始阶段，由于流动相中的溶剂组分与色谱柱的平衡，可能会产生较大的系统峰。特别是在使用含有有机溶剂（如乙腈）和0.1%三氟乙酸（TFA）的流动相时，这种现象更为常见。

• • wb目的条带连成一条，内参正常，可能原因

  如果您的 WB（Western Blot）目的条带连成一条，但内参正常，可能的原因包括： 1.过度加载样本： 如果您加载的目标蛋白质样本过多，它们的条带可能会连成一条，因此请确保加载适量的样本。 2.抗体亲和力过强或浓度过高： 使用的一抗或二抗过于亲和或浓度设置得过高，导致过度染色。