蛋白分析FAQ汇总
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• 拿到蛋白质组数据后，应该怎么分析，里面什么都有，我要做的是什么？
拿到蛋白质组学数据后，您可以进行一系列分析来提取有意义的生物学信息。蛋白质组学数据分析的步骤和具体目标可能会根据您的研究目的和数据类型（如质谱数据、蛋白芯片数据等）而有所不同。 1.质量控制： 检查数据质量，确保没有技术误差。 2.蛋白鉴定： 使用质谱软件与蛋白质数据库匹配，鉴定样本中的
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WB转膜出现以上情况可能是由下面几个因素造成的： 1.膜转移效率不足： 如果膜转移效率不高，可能会导致marker颜色浅。这可能是由于电转膜的电压或时间设置不当，或者使用的膜与蛋白质的亲和力不足。 2.样品过载或电泳条件不当： 如果样品加载过多或电泳条件不适宜（如电压过高或运行时间过长）
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在Western Blot (WB) 分析中，如果出现蛋白带两边深中间浅的现象，最可能的原因是样品过载。当在凝胶槽中加载的蛋白质量超过了其分离能力时，蛋白质在电泳过程中可能无法均匀迁移，尤其是在凝胶的中心部位。这会导致蛋白在边缘处迁移得更快或更远，造成带的中间部分相对较浅。
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• 请问WB实验封闭时转速被误调为130r，对结果会有影响吗?
在Western Blot实验中，如果封闭（阻塞）步骤的转速被误设为130 rpm，一般情况下对实验结果的影响不大。封闭步骤的主要目的是阻止非特异性抗体结合，而这一过程主要取决于阻塞剂的类型和浓度，以及封闭时间的长度。 转速的调整主要是为了确保阻塞剂在膜上均匀分布，避免出现干斑或未覆盖区域
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Western Blot（WB）实验中趋势不一致通常指的是重复实验之间结果差异较大。应对这一问题时，主要策略是仔细检查实验的各个步骤，以确保一致性和准确性。具体措施包括： 1、样品制备： 确保样品的蛋白质浓度一致。使用蛋白酶抑制剂以防止蛋白质降解。确保样品在实验过程中的处理方式一致。 2
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1.转移效率低下： 电压是推动膜材料从一个表面转移到另一个表面的驱动力。如果电压太低，可能不足以有效地完成这个过程，导致转移效率降低。 2.不均匀的转移： 由于电压不足，膜材料可能无法均匀地转移，这可能导致转移后的膜出现厚薄不一、缺陷或瑕疵等问题。 3.膜质量差： 膜的完整性和均匀性对于
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• 样品寄送过程,哪些需要低温?哪些需要干冰?哪些常温就可以?
样品寄送的温度要求主要取决于样品的性质。下面是一些常见的样品类型及其相应的温度要求： 1.生物样品（如血液、细胞、组织）： 这些样品通常需要在低温下运输，以防止细胞活性的丧失或分解。它们通常需要干冰或者液氮来保持低温。 2.化学试剂： 某些化学试剂在常温下可能会分解或反应，因此需要低温保
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Western Blot（WB）实验中的上样体系（Loading Buffer 或 Sample Buffer）通常包含几个关键成分： Tris-HCl 缓冲液：通常浓度为 0.5 M，pH 值约 6.8。 SDS（十二烷基硫酸钠）：通常浓度为 10%。 甘油：通常浓度为 20-
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在Western Blot (WB) 实验中安排样本顺序时，主要考虑以下几点： 1、对照样本： 将正对照（表达目标蛋白的样本）和负对照（不表达目标蛋白的样本）放在实验的开始和结束位置，以便于结果的比较和确认。 2、重复样本： 如果实验中包括重复样本，应将重复样本并排放置，以便于结果的比较和
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Western Blot（WB）实验中出现的条带空白且发光（通常指在成像时出现过曝光的现象）可能由以下原因造成： 1、样品蛋白浓度过高： 如果加载的样品蛋白浓度过高，可能导致信号过强，造成条带处发光。解决方法是稀释样品，减少加载量。 2、一抗或二抗浓度过高： 抗体浓度过高会导致非
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