蛋白分析FAQ汇总

• • 请问如何制备蛋白质谱样本?

  蛋白质谱样本的制备是一项复杂的任务，需要在各个步骤中精确地控制实验条件。包括蛋白质的提取、纯化、定量、消化、纯化以及重悬。下面列出了一般的步骤和技巧。一、蛋白质提取：从生物组织或者细胞中提取蛋白质。使用适当的缓冲液进行细胞破碎，例如RIPA缓冲液、PBS等；常用的物理破碎方法包括超声、高压均

• • 圆二色光谱蛋白质中含有多个蛋白,该怎么选择氨基酸残基 数和分子量呢?

  在进行含有多个蛋白的样品圆二色谱（CD）分析时，选择氨基酸残基数和分子量时应考虑：氨基酸残基数：选择适合的氨基酸残基数主要是为了确保光谱的信号强度足够清晰，通常建议蛋白质的氨基酸残基数在50到200之间。较短的多肽可能信号较弱，而过长的蛋白质则可能导致光谱复杂。分子量：分子量会影响蛋白质的结

• • 请问用标准曲线怎么算摩尔比呢？

  用标准曲线法计算摩尔比，首先根据已知浓度的标准品制备一系列浓度不同的标准溶液，然后测量它们的响应（比如吸光度），绘制标准曲线。最后，通过测量待测样品的响应值，根据标准曲线的方程计算出待测样品中目标物质的摩尔比。

• • 质谱测蛋白修饰位点，位点会有和实际不一致的情况吗？

  是的，质谱测定蛋白修饰位点可能会出现与实际不一致的情况，主要有以下一些原因：1、技术局限性：虽然质谱技术是一种强大的工具，能够精确地检测蛋白质修饰位点，但任何技术都有其局限性。质谱的分辨率和灵敏度可能受到多种因素的影响，如样品处理、仪器状态、分析参数设置等。这些因素可能导致质谱检测到的修饰位

• • 请问有鸟苷尿苷这类的薄层分析吗？

  薄层分析可以用于检测核苷酸类物质，包括鸟苷尿苷等。

• • 双向电泳图像是用什么软件拍的?

  双向电泳图像通常使用专门的设备和软件进行拍摄：1、设备：凝胶成像系统 这些系统通常配有高分辨率的摄像头和紫外光或白光照明装置，适用于拍摄电泳后的凝胶图像。常见品牌包括Bio-Rad、Cytiva、Syngene、LI-COR等。2、软件：Image Lab（Bio-Rad）Bio-Rad公司

• • 双向电泳图像分析，跑完二向染色之后用什么软件看胶条?

  可以使用ImageMaster 2D Platinum、PDQuest、Progenesis SameSpots或Delta2D等软件进行双向电泳图像分析。

• • 蛋白提取定量后pbs和loading buffer加少了,能补加pbs和loading buffer吗？

  蛋白提取定量后pbs和loading buffer加少了，可以补加PBS和loading buffer；确保充分混匀后再进行后续步骤。

• • 有蛋白交联的protocol吗?方便分享下吗

  以下给您提供了一个常见蛋白交联的protocol可供参考，具体操作还需要根据蛋白质和交联剂的不同进行优化。1. 准备交联剂 选择合适的交联剂（如戊二醛、BS3等），按照说明书配制成适当浓度的工作液。2. 溶解蛋白质 将待交联的蛋白质溶解在合适的缓冲液中（通常是PBS或HEPES缓冲液），浓度

• • 请问UPLC-Q-TOF-MS不跑QI可以定量吗？

  UPLC-Q-TOF-MS 不跑QI进行定量分析是可行的，通常可以通过峰面积或峰高来实现。通过比较样品中目标组分的峰面积或峰高与已知浓度的标准品的峰面积或峰高，可以计算出目标组分的浓度。但是这种方法一般不推荐。因为不使用QI会降低分析的选择性和灵敏度，不能专门监测特定的离子对。这可能导致数据