蛋白分析FAQ汇总

• • far-western跑出来的条带是白色的，请问这是为什么呀？要怎么解决呢？

  在Far-Western Blot实验中，条带出现白色通常与曝光过度、蛋白过量、抗体浓度过高、检测底物不均或膜转印不完全有关。为解决此问题，可以缩短曝光时间、减少样品蛋白和抗体的用量、确保底物均匀分布以及优化蛋白转移条件。这些调整有助于改善实验条带的显色效果。

• • 蛋白质降解的特性有哪些？

  蛋白质降解是一个非常关键的生物过程，其主要特性包括：选择性、时序性、空间性、可逆性、动态性、依赖性、特异性

• • 请问做人血浆蛋白质组学什么情况需要去除高丰度蛋白呢?

  在做人血浆蛋白质组学时，需要去除高丰度蛋白的情况包括：提高低丰度蛋白的检测灵敏度，研究特定生物标志物，提高数据的重现性和准确性，优化样品分离和分析方法。

• • 为什么多聚谷氨酸PH小于等于4时R基团不带电呢？

  多聚谷氨酸的R基团是侧链羧酸基（-COOH），当pH小于或等于4时，环境中氢离子浓度较高，羧酸基会质子化，从而变为不带电的形式（-COOH）。此时，羧酸的离解常数（pKa）未达到，使得R基团中的负电荷被质子中和。因此，在这种酸性环境下，R基团表现为中性，不带电。

• • 请问怎么看一个蛋白的糖基化位点多不多？

  查看一个蛋白的糖基化位点多不多，常用的途径有数据库查询、通过生物信息学预测和实验检测等多种方式。

• • 请问预测N-糖基化位点可以用什么软件来测试呢？

  在生物研究领域，对于N-糖基化位点的预测，研究者们常用到一些生物信息学的软件和平台，如NetNGlyc、GlycoEP、GPP Prediction Server等。这些软件都有各自的特性和优势，一般会根据实际研究需求来选取。

• • 请问有没有泛sumo的抗体推荐？

  在选择泛SUMO抗体时，可以使用的泛SUMO抗体包括CST的#4940和#4971，Santa Cruz的sc-5308和sc-32874，以及Abcam的ab133352和ab3742。选择时应考虑特异性、灵敏度和实验适用性，并查阅技术资料和用户评价。

• • 请问有什么荧光探针可以用来检测二硫键吗？

  二硫键对蛋白质的结构和功能至关重要，检测其存在的荧光探针具有重要应用价值。Cyanine5-maleimide通过与硫醇基团反应形成稳定的硫醚键，发出近红外光，适合深层组织成像。而ThiolTracker™ Violet则专门用于细胞内二硫键的检测，具有高选择性和敏感性，发出紫外光信号，且可

• • 如果直接用sumo化抗体检测该细胞sumo水平是不是应该泛sumo和sumo1和sumo2/3都得测?

  在使用SUMO化抗体检测细胞中的SUMO水平时，最好同时测量泛SUMO、SUMO1和SUMO2/3。泛SUMO抗体提供总体修饰水平的概览，而SUMO1和SUMO2/3抗体则能定量特定亚型的修饰情况，以便深入了解它们在细胞功能中的作用。尽管在某些情况下，如只关注SUMO1时，可以选择不测量其他

• • 请问蛋白质表面连接一个肽类能否用质谱检测？

  质谱可用于研究蛋白质和肽的结构以及它们之间的相互作用。如果一个蛋白质表面连接一个肽，质谱可以用来鉴定和定量这种连接，以及了解其在生物学过程中的作用。质谱可以推导出肽的氨基酸序列和蛋白质的结构信息，包括连结点，鉴定蛋白质的化学修饰，以及测量蛋白质及其复合物的分子质量。