蛋白分析FAQ汇总

• • 什么是四极质谱仪？

  一个四极质谱仪由四个平行杆组成，其方向类似于罗盘上的四个极。南北对的射频和直流电压是一个极性，东西对的射频和直流电压是相反的极性。六极杆和八极杆相似，但分别有六根和八根杆。它们被用作碰撞和/或存储单元。在串联质谱仪（例如三重四极杆或 Q-Tofs）中，四极杆可用作一个质谱仪或一种离子传输模式

• • 2000的分辨能力是什么意思？

  在最简单的形式中，它意味着可以区分质量数为 2000 的峰和质量数为 2001 的峰。分辨率有更正式的定义，即 M/Dm，其中 M 是测量分辨率的质量，而 Dm 是两个等量级峰之间的质量差，其中峰之间的谷值为 10%。质量分辨能力是针对单个峰定义的，其中 Dm 是峰高 50% 处的峰全宽（即

• • 差异凝胶电泳2D DIGE 进行定量蛋白质组学分析需要进行技术复制吗？

  差异凝胶电泳2D DIGE 进行定量蛋白质组学分析，可以不进行技术重复。相关服务:二维凝胶电泳服务

• • 除了 N-和 O-糖基化，生物治疗药物最突出的 PTMs 是什么？

  大多数蛋白质对甲硫氨酸的氧化很敏感，在极少数情况下对色氨酸或组氨酸的氧化也很敏感。天冬酰胺的脱酰胺和谷氨酰胺较低程度的脱酰胺，以及脯氨酸和赖氨酸的羟基化经常出现。进一步的修饰是加二硫键、糖基化、磷酸化、硫酸化和末端截短。相关服务:翻译后修饰蛋白组分析

• • 序列验证需要多少材料？

  我们通常建议用 75 µg 进行 3 种不同的蛋白酶消化，以实现 100% 的序列覆盖。但根据您的蛋白质，每次 25 µg 的一到两次的消化物就足够了。相关服务:序列分析

• • 什么是 SDS-PAGE 凝胶？什么是还原条件与非还原条件？

  SDS-PAGE（sodium dodecyl sulfate – polyacrylamide gel electrophoresis）是一种按质量分离蛋白质的方法。SDS 是一种离子型去污剂，可以变性并结合蛋白质，使蛋白质带上均匀的负电荷。这意味着当向聚丙烯酰胺凝胶施加电流时，与 SDS

• • 分析型反相色谱显示什么？

  分析型反相色谱用于评估蛋白质纯度和结构均一性。均一性通过多个峰的缺失和主峰的对称性来判断。在这些痕迹中寻找一个尖峰；这表明样品中存在单一物种而没有污染。相关服务:蛋白质纯度分析（分子筛/反相色谱）

• • 为什么预染蛋白标记物的表观分子量值在不同凝胶类型中不同？

  当蛋白质与带电荷的染料分子共价结合时，会影响蛋白质的总电荷。改变蛋白质的电荷很可能会改变它在凝胶中的流动性。这就解释了为什么预染色的蛋白质标记被赋予“表观”分子量值，而常规未染色的蛋白质标记被赋予真实分子量。数据卡和其他参考文献上预染色蛋白标记物的表观分子量状态是用 10-20% Tris-

• • 是否需要对蛋白质样品进行去糖基化以进行蛋白质组学分析？

  如果蛋白质被糖基化，任何给定的片段都将作为糖型的集合存在，因为相同的肽带有多种聚糖结构。蛋白质组学分析软件通常不是为处理出现的无数可能性而设计的，因此片段将无法识别。这就是在进行这些实验之前通常建议进行去糖基化的原因。相关服务:组学分析

• • 蛋白质测序和核酸测序有什么区别？

  对于蛋白质测序，Edman测序和质谱测序方法都通过化学反应或高能碰撞和共价键而破坏蛋白质的化学键分析氨基酸残基序列。核酸测序是基于DNA复制的原理，利用DNA酶重新合成新的链，而不破坏母链。在这个过程中，新链的合成被随机打断，新的核苷酸被合成和吸收，从而确定母链的相应序列。相关服务:序列分析