蛋白分析FAQ汇总

• • WB蛋白印迹显色用DAB还是ECM呢？

  DAB和ECM都各有优缺点，在实际应用时要根据具体的实验目的按需选择。DAB的显色效果比较灵敏，但是具有毒性；ECM的结果比较容易控制，但是灵敏度比起DAB稍差一些。相关服务:蛋白质免疫印迹和电转移服务

• • 用细胞样本提取蛋白做WB，需要多少细胞？

  一般5×106就足够了。相关服务:蛋白质免疫印迹和电转移服务

• • 提取过RNA的样本再提取蛋白来做WB实验有影响吗？

  没有影响。相关服务:蛋白质免疫印迹和电转移服务

• • 同一个蛋白样品可以同时进行多种因子的WB分析吗？

  可以。相关服务:蛋白质免疫印迹和电转移服务

• • 质谱鉴定是出现质量偏差怎么办？

  出现质量偏差可以考虑进行仪器校正，一般3个月就要校一次机。相关服务:蛋白质质谱鉴定

• • 质谱图为什么只有溶剂峰没有样品分子离子峰？

  这种情况可以考虑进样针是否损坏、载气流速是否太低、样品浓度是否太低或者样品是否被柱或进样器衬套吸附。相关服务:蛋白质质谱鉴定

• • 为什么进行多通道扫描MRM时会出现离子交互影响？

  如果先后进入离子扫描通道的碎片离子分子量单位一样或相差很小，碰装室里的上一个碎片离子来不及清除，就会与下一个碎片离子产生交互影响。相关服务:MRM/PRM定量蛋白组学分析

• • 如何消除MRM扫描的离子交互影响？

  1、可以考虑选择特异的碎片离子；2、适当增加前后扫描之间的时间间隔； 3、还可以设置额外的离子扫描通道。相关服务:MRM/PRM定量蛋白组学分析

• • iTRAQ定量重复性好不好？

  iTRAQ的定量重复性是指同样的样本在不同的上机检测时得到的结果是否一致。一般得分较低或比值较靠后的蛋白才会出现严重的定量偏差，绝大部分的蛋白比值趋势是一致的。一般来说，由于质谱选取肽段的随机性，可能导致检测到的肽段及其强度不同，在经过软件匹配分析后，得相关服务:基于标签的蛋白质定量技术-i

• • 用不同的检索数据库分析iTRAQ定量数据为什么得到的组件比值不同？

  使用不同数据库检索iTRAQ数据，可能会出现由于肽段匹配情况不同导致的些许定量结果差异，但是总体变化趋势应是一致的。相关服务:基于标签的蛋白质定量技术-iTRAQ，TMT， SILAC