蛋白分析FAQ汇总
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LC-MS是定量鉴定,若要进行定性鉴定,需要在蛋白定量后各取相同量的蛋白进行还原化和烷基化。相关服务:蛋白质质谱鉴定
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答案是肯定的,要求至少提供50ug蛋白,浓度不低于5ug/ul。相关服务:蛋白质质谱鉴定
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• 蛋白互作技术IP、Co-IP、pull down有什么区别?
IP(免疫沉淀):利用抗体去特异性结合抗原(样品中的目标蛋白),以寻找或验证与抗体有相互作用的蛋白、纯化富集目的蛋白的;Co-IP(免疫共沉淀):利用抗体去识别并结合两个相互作用的蛋白,可以验证两种已知蛋白是否存在相互作用,或者验证在样品总蛋白中是否含有与已知蛋白相互作用的未知蛋白;Pull
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一般主要观察可信度(Total Ion Score)和蛋白比值两个参数。 相关服务:蛋白质质谱鉴定
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一般可信度在80%以上就认为可信度较高,数据可用,可信度越高数据一般就越准确,重复性越高。相关服务:蛋白质质谱鉴定
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如果在这些数据中有感兴趣蛋白,可以再利用ELISA、WB、Q-PCR等进行验证。相关服务:蛋白质质谱鉴定
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蛋白比值指的是两个蛋白样本之间的比值(Tag-80/Tag-0),如果两样本的比值在0.9-1.1之间的,可以认为两样本的含量是一样的;而小于0.9或大于1.1均可认为两样本之间的比值是有差异的。相关服务:蛋白质质谱鉴定
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不是,质谱检测的是蛋白被打碎后的离子,所以得到的质谱图是离子图谱。相关服务:蛋白质质谱鉴定
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交互作用较弱可能是由于蛋白之间的相互作用较弱或不稳定;或者可能缓冲液中的去污剂浓度过高。相关服务:CO-IP免疫共沉淀法蛋白互作分析
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抗体浓度太高或者抗体特异性不强都可能导致假阳性高。相关服务:CO-IP免疫共沉淀法蛋白互作分析
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