蛋白分析FAQ汇总
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蛋白质的纯度和精确浓度是分析二级结构的关键,一般要求样品纯度不低于90%,且不能含有任何保护剂或其它含有光吸收的杂质;样品浓度需稀释为为0.2ug/ul。相关服务:蛋白质圆二色谱分析
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远紫外区的圆二色扫描图谱反映的是蛋白质的肽键信息,可以用于计算α螺旋、β折叠、转角和不规则卷曲等二级结构的比例;近紫外区的圆二色扫描图谱反映的是蛋白质侧链生色基团的排布信息,如Trp、Phe、Tyr等残基的排布信息和二硫键微环境的变化。相关服务:蛋白质圆二色谱分析
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若不确定蛋白样品的紫外吸收波长可以先扫个紫外全谱,然后根据最大吸收峰的波长来确定圆二色谱的波长,再扫圆二色全谱并根据最大紫外吸收峰波长进行微调。相关服务:蛋白质圆二色谱分析
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当然不会,蛋白质是基因表达的最终产物,但是与基因之间并没有严格的线性关系,转录组水平也并不对应蛋白质水平,且基因组和转录组水平也看不出蛋白翻译后修饰等现象。相关服务:蛋白质组学
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蛋白样品上机获得MS谱图-利用搜库软件如MaxQuant等检索质谱下机数据,获得蛋白/肽段的初始信息-进行可信度等质控分析-定性定量分析-数据注释/挖掘等分析相关服务:蛋白质质谱鉴定
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相比传统的WB蛋白定量技术,基于质谱的PRM技术不需要抗体标记,操作简单,且特异性、灵敏度和通量都得到了大大的提升。相关服务:MRM/PRM定量蛋白组学分析
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利用抗体抗原特异性结合的原理,将经SDS-PAGE分离的蛋白质从凝胶上转移至固相薄膜上,再利用抗体特异性结合目标蛋白然后进行显色观察。相关服务:蛋白质免疫印迹和电转移服务
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WB的实验流程主要包括样本制备、SDS-PAGE电泳分离、转膜、洗脱、抗体杂交和底物显色。相关服务:蛋白质免疫印迹和电转移服务
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常用的制备WB蛋白样本的方法主要有水溶液提取法、有机溶剂提取法、离心柱提取法、层析法以及电洗脱法等,其中离心柱提取法耗时短,简单方便,重复性强且效果好,是比较受欢迎的蛋白提取法。相关服务:蛋白质免疫印迹和电转移服务
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可以选择微孔较小的膜或将两张膜叠加在一起,同时缩短转膜的时间。相关服务:蛋白质免疫印迹和电转移服务
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