蛋白分析FAQ汇总

• • 样品的纯度或清洁度是否会影响数据的输出？

  像大多数科学实验一样，更高质量的样品会产生同样更高质量的结果。严格的提取技术，去除盐，洗涤剂，聚合物和其他对质谱仪有害的化合物，将产生更好的结果。更清洁的样品还可以延长色谱柱的使用寿命。洗涤剂和盐是质谱检测的障碍。相关服务:蛋白分析

• • 你们能检测出蛋白质上所有可能的翻译后修饰吗？通过质谱法，你们可以看到蛋白质上哪些类型的修饰？

  氨基酸残基上可能有许多不同的修饰。许多可以通过我们的质谱法检测，如磷酸化，甲基化，乙酰化，氧化等。然而，有些修饰根据添加物的大小、电离和稳定性方面不可能检测到。额外的处理步骤和/或特定的定制质谱仪被用于不同类型的修饰。相关服务:翻译后修饰蛋白组分析

• • 如何处理需要特殊储存或处理的样品？

  光敏 对光敏感的样品可以放在覆盖有铝箔的小瓶中。 低温储存 如果样品需要保存在低温（冷藏或冷冻）下，请联系我们。 空气敏感 对空气敏感或不稳定的样品需要特别注意。请在提交样品前提前与我们联系以进行安排。 酸/碱敏感 如果向样品中加入酸或碱，某些样品会降解。如果您提交的样品对酸或碱敏感，请注明

• • 什么是单位质量或精确质量？我应该要求哪一个？

  单位质量 在单位质量或标称质量中，质量通常精确到十分之几Da。标记为低分辨率的质谱仪通常提供单位质量。 精确质量 在精确质量测量中，使用高分辨率质谱仪将质量精确地确定到小数点后四位。通常，质量精度低于5 ppm。仅针对提交给ESI和APCI的样品提供精确质量。相关服务:精确质量测定

• • 色谱柱的背压异常高该怎么办？

  假如设备没有问题，我们建议您更换色谱柱，并以相反方向清洗色谱柱，以确保色谱柱顶部没有堆积物。相关服务:蛋白质纯度分析（分子筛/反相色谱）

• • 如何清洗受污染的色谱柱？

  使用具有更多离子的更强流动相以相反的方向清洗色谱柱。对于反相混合模式色谱柱，使用 60-70% 的乙腈和 0.3% 的硫酸或磷酸。或者使用50-100mM甲酸铵缓冲液（pH3）和60-70%的ACN。对于 HILIC 混合模式色谱柱，使用较少的乙腈 (20-30%)清洗 ，但添加剂的用量与R

• • 如何制备和调整流动相的pH值？

  建议制备缓冲液的水溶液，然后使用与缓冲液相同的酸来调节pH值——甲酸用于甲酸铵，乙酸用于乙酸铵。对于更稳健的方法，请将pH值保持在所需pH值的0.05单位内。相关服务:蛋白质纯度分析（分子筛/反相色谱）

• • 如果待分析化合物在甲酸或乙酸流动相中没有洗脱该怎么办？

  可以换用相对应的缓冲液。盐会产生更多离子，可用于增加流动相的强度。相关服务:蛋白质纯度分析（分子筛/反相色谱）

• • LC色谱柱上可以注入多少样品而仍能避免谱带展宽？

  进样量以及最佳流速受到色谱柱尺寸的限制。理想情况下，如果样品与流动相使用相同的溶剂，则大致体积应为：30-100mm色谱柱的样品体积1-3ul；50-150mm色谱柱的样品体积2-12ul；50-250mm色谱柱的样品体积8-40ul。相关服务:蛋白质纯度分析（分子筛/反相色谱）

• • 蛋白纯化——分析色谱和制备色谱的区别是什么？

  分析色谱法用于确定样品中分析物的存在以及可能的浓度。 例如通过尺寸排阻色谱法估计抗体样品中的聚集体/二聚体含量。制备色谱用于纯化足够量的物质以供进一步使用，例如用于功能或结构研究。相关服务:蛋白质纯度和均一性表征