蛋白分析FAQ汇总

• • 如何将CD数据标准化？

  CD数据标准化的方式是以MRE（平均剩余椭圆率）作为波长的函数，MRE考虑了浓度，因此将其针对浓度误差进行了标准化。MRE所需要的只是蛋白质中氨基酸的路径长度、浓度和数量。相关服务:蛋白质圆二色谱分析

• • 圆二色谱分析需要多少蛋白质？

  一般来说，需要细胞、缓冲液和蛋白质的总吸光度在0.4-1.0之间（理论上0.87最佳）。这意味着对于0.01cm的细胞来说，需要20-50ul浓度为0.2-0.5mg/ml的蛋白质来记录178nm的光谱。相关服务:蛋白质圆二色谱分析

• • HPLC可以检测什么？

  只有溶解在溶剂中的化合物才能用HPLC进行分析。HPLC分离溶解在液体样品中的化合物，并可以定性和定量分析样品中包含哪些成分以及每种成分的含量。相关服务:序列分析

• • 如何从质谱中找到蛋白质的分子量？

  通过公式M/Z=（M+质子）/n求出质量M，其中n表示电荷。相关服务:蛋白质质谱鉴定

• • 未知蛋白如何进行序列分析？

  未知蛋白或新发现蛋白没有可用的蛋白数据库，只能依赖质谱进行从头测序。相关服务:从头测序

• • 二维凝胶电泳（2-DE）为什么会出现横向条纹？

  横向条纹可能是由于样本中含有杂质，或者聚焦不完全和聚焦过度导致的。相关服务:二维凝胶电泳服务

• • 等电聚焦电泳或聚丙烯凝胶电泳为什么有一条蓝色的条带随电泳移动，而颜逐渐变黄？

  这是因为样本中加了颜色指示剂——溴酚蓝，溴酚蓝在酸性条件下呈黄色，碱性条件下呈蓝色，通过溴芬兰的颜色和移动的效果可以初步判断电泳效果的好坏。相关服务:1D SDS-PAGE和IEF服务

• • 利用SILAC稳定同位素标记细胞后，多长时间可以提取细胞蛋白进行后续质谱鉴定？

  SILAC为体内标记，其随着细胞增殖对蛋白进行标记，通常需要将细胞培养并传代至5-6代，再提取细胞蛋白进行质谱分析。相关服务:基于SILAC/Dimethyl标记的定量蛋白组分析

• • 蛋白质空间结构分析的方法有哪些？

  目前常用的蛋白质、多肽空间结构研究方法主要有X-ray晶体衍射技术、核磁共振技术和圆二色谱技术等。 相关服务:蛋白质结构鉴定

• • 蛋白质CD谱数据的好坏怎么评判？

  评估CD谱数据好坏最主要的参数是吸收谱，若吸收值在0.5-2.0之间，则表明数据可信度较高。相关服务:蛋白质圆二色谱分析