蛋白分析FAQ汇总
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通过公式M/Z=(M+质子)/n求出质量M,其中n表示电荷。相关服务:蛋白质质谱鉴定
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未知蛋白或新发现蛋白没有可用的蛋白数据库,只能依赖质谱进行从头测序。相关服务:从头测序
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横向条纹可能是由于样本中含有杂质,或者聚焦不完全和聚焦过度导致的。相关服务:二维凝胶电泳服务
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• 等电聚焦电泳或聚丙烯凝胶电泳为什么有一条蓝色的条带随电泳移动,而颜逐渐变黄?
这是因为样本中加了颜色指示剂——溴酚蓝,溴酚蓝在酸性条件下呈黄色,碱性条件下呈蓝色,通过溴芬兰的颜色和移动的效果可以初步判断电泳效果的好坏。相关服务:1D SDS-PAGE和IEF服务
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• 利用SILAC稳定同位素标记细胞后,多长时间可以提取细胞蛋白进行后续质谱鉴定?
SILAC为体内标记,其随着细胞增殖对蛋白进行标记,通常需要将细胞培养并传代至5-6代,再提取细胞蛋白进行质谱分析。相关服务:基于SILAC/Dimethyl标记的定量蛋白组分析
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目前常用的蛋白质、多肽空间结构研究方法主要有X-ray晶体衍射技术、核磁共振技术和圆二色谱技术等。 相关服务:蛋白质结构鉴定
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评估CD谱数据好坏最主要的参数是吸收谱,若吸收值在0.5-2.0之间,则表明数据可信度较高。相关服务:蛋白质圆二色谱分析
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蛋白质的纯度和精确浓度是分析二级结构的关键,一般要求样品纯度不低于90%,且不能含有任何保护剂或其它含有光吸收的杂质;样品浓度需稀释为为0.2ug/ul。相关服务:蛋白质圆二色谱分析
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远紫外区的圆二色扫描图谱反映的是蛋白质的肽键信息,可以用于计算α螺旋、β折叠、转角和不规则卷曲等二级结构的比例;近紫外区的圆二色扫描图谱反映的是蛋白质侧链生色基团的排布信息,如Trp、Phe、Tyr等残基的排布信息和二硫键微环境的变化。相关服务:蛋白质圆二色谱分析
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若不确定蛋白样品的紫外吸收波长可以先扫个紫外全谱,然后根据最大吸收峰的波长来确定圆二色谱的波长,再扫圆二色全谱并根据最大紫外吸收峰波长进行微调。相关服务:蛋白质圆二色谱分析
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