蛋白分析FAQ汇总
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对于含有许多蛋白质的复杂样品,每个凝胶上的蛋白质上样量应在50至300微克左右,对于纯蛋白质样品应为5至50微克。相关服务:蛋白鉴定
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2D PAGE是从复杂的蛋白质组学样品中分离和可视化许多蛋白质的最佳选择。但是,对于大的疏水性的蛋白质,最好使用1D SDS PAGE。相关服务:凝胶及图像分析
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您可以使用TCA沉淀、冰乙醇/丙酮沉淀,或经典丙酮沉淀。相关服务:凝胶及图像分析
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肽越来越多地被用作生物制剂中的活性药物成分(API),我们进行的生物肽表征项目也越来越多。肽制剂的典型分析研究肽的身份、序列、异质性、完整质量、稳定性、降解产物、单个氨基酸的数量等。相关服务:多肽组学
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有各种类型的质谱。 首先,是基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)。该质谱被认为是一种软电离方法,通过用激光束在不分解的情况下产生离子。正离子被电场加速,以使任何带相似电荷的离子具有相同的动能。离子的速度取决于m/z比,以及MALDI-TOF MS检测离子所需的时间。这
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质谱分析分三个主要步骤完成。 质谱分析的第一步是电离,即将热量施加到样品分子上以将其转化为气体。然后使用离子源将气体转化为离子而将样品分子电离。 第二步是根据质量对离子进行分类,分两个阶段完成——加速和偏转。离子的加速速度取决于其质量,较轻的分子比较重的分子移动得快得多。离子束射入磁场,然后
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M代表质量,Z代表离子的电荷数。在质量分析中,从分子中取出一个电子以产生单电荷离子。如果除去两个电子,则产生双电荷离子。被除去的电子数就是电荷数(对于正离子)。m/z表示质量除以电荷数,质谱中的横轴以m/z为单位表示。由于GCMS的z几乎总是1,因此m/z值通常被认为是质量。相关服务:蛋白质
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质量分析中使用的质量数定义如下。由6个质子和6个中子组成的碳12同位素的质量数定义为整数12。碳12质量的1/12的部分被定义为质量单位。使用该单位测量时,氢原子的质量数为1.007825,氮原子的质量数为14.003074,氧原子的质量数为15.9949146。有机化合物由碳、氢、氮、氧和
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S/N表示信号强度S除以基线噪声宽度N。换言之,S/N值越大,相对于噪声信号强度越好,灵敏度越高。相关服务:蛋白质质谱鉴定
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电泳后,肉眼无法直接观察到蛋白质分离,需要后续的染色技术。考马斯亮蓝染色和银染色是常规检测和定量电泳分离的蛋白质的常用方法。经过固定-染色-脱色等简单处理后,可以清楚地观察到蛋白质的分布。随着高灵敏度蛋白质分析方法和蛋白质鉴定技术的改进,新的染色方法如荧光标记、同位素标记技术都大大提高了灵敏
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