氨基酸分析仪是如何工作的？

氨基酸分析是一种基于离子交换液相色谱的技术，有广泛的应用领域，以提供定性和定量的成分分析。 操作的基本原理是由Spackman，Moore和Stein于1958年开发的连续流动色谱程序。目前，这一基本原理已经过改进，可以进行全自动、高速、灵敏的分析。有时，这被称为经典氨基酸分析。 将含有氨基酸混合物的样品加载到阳离子交换树脂柱上。然后将具有不同pH值和离子强度的缓冲液泵入色谱柱以分离各种氨基酸。色谱柱温度得到精确控制，并可根据需要进行改变，以产生所需的分离。将柱洗脱液与茚三酮试剂混合，该混合物通过高温反应线圈。在反应线圈中，茚三酮与洗脱液中的氨基酸反应形成有色化合物。产生的有色化合物的量与洗脱液中存在的氨基酸的量成正比。 从反应线圈中，洗脱液/茚三酮混合物被送入光度计单元，在此通过测量吸收的光量来确定每种有色化合物的量。光吸收是在两个波长（570nm和440nm）下测量的，因为氨基酸产生的有色化合物吸收波长为440nm或570nm的光。 光度计输出连接到双通道图表记录仪，该记录仪将氨基酸浓度绘制为一系列峰，或连接到适当的积分系统。图表上峰的保留时间确定了氨基酸，峰下的面积表示存在的氨基酸的量。由于氨基酸分析仪是一种比较仪器，因此在开始一系列分析之前必须进行校准分析，以产生用于比较的标准迹线。



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