蛋白分析FAQ汇总

• • WB电泳跑完后，背景很深，目的蛋白很模糊是什么原因？

  背景比较重可能是二抗浓度高了或者二抗洗得不彻底；如果只是目的条带模糊，可能蛋白表达量本身就低，或者一抗浓度不够。相关服务:蛋白质免疫印迹和电转移服务

• • 为什么WB用丽春红染膜能看到清晰的条带但是最终发光的片子上却看不到？

  染膜后能看到条带说明转膜没问题，可以排查转膜后的步骤。相关服务:蛋白质免疫印迹和电转移服务

• • WB转膜时蛋白marker是不是可以不转？

  可以，但是不转marker在样本比较多的时候不容易区分。样本较少时可以不转，这样后期孵抗体的时候可以将膜封闭到很小的空间里进行孵育，可以节省抗体。相关服务:蛋白质免疫印迹和电转移服务

• • 差异表达蛋白怎么结合临床指标做分析？

  将差异蛋白和临床指标统计数据基于皮尔森相关系数或斯皮尔曼等相关系数去做相关性分析，若相关性系数在0.8以上的，可以判断某个差异蛋白和某个临床指标之间相关性比较高。相关服务:差异表达蛋白质统计分析

• • 石蜡切片样本做蛋白组学需要多少量？

  通常建议按照10um的石蜡切片9片/样，且每3片的重量保持在1mg以上较好。相关服务:石蜡包埋样品蛋白质组学

• • 如果DIA数据需要依靠DDA建库的话要怎么操作？

  首先对每个样本进行酶解除盐，接着将所有样本的肽段等量混合并利用LC对混合肽段进行分离，然后进行质谱检测，将获得的混合肽段谱图利用搜库软件进行搜库，建立DDA库。相关服务:DIA定量蛋白质组学

• • 长期保存在低温下的病理蜡块或者病理切片可以做PCT-DIA吗？

  对于长期保存超过5年的的样本，建议先用少量样本进行一个预实验，根据预实验结果判断样本的可用性。相关服务:PCT-DIA蛋白质组学

• • 有什么办法可在不破坏病理切片情况下取样？

  由于要进行蛋白抽提，因此无法避免对病理切片的破坏。建议可以取一部分病理切片用来做蛋白鉴定，另外再留存部分病理切片。相关服务:石蜡包埋样品蛋白质组学

• • 液氮标本和石蜡标本鉴定结果有差异吗？

  石蜡样本相对于液氮保存/冻存样本，蛋白降解的可能性更大。但是具体差别有多大，要看石蜡标本保存的情况。相关服务:石蜡包埋样品蛋白质组学

• • 血清样本做蛋白质组学鉴定，高丰度蛋白要不要去除呢？

  建议去除，因为高丰度蛋白会抑制低丰度蛋白的检出，去除血清中常见的十几种高丰度蛋白后，更有利于一些相对低丰度且有研究价值的蛋白的检出。相关服务:蛋白质组学